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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA
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更新時間:2017-06-06 09:54:11瀏覽次數(shù):364

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【簡單介紹】
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA ,采用干冰保存運輸收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購
細胞名稱  人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA  
形態(tài)特性   成纖維細胞樣   
生長特性  貼壁生長  
特征特性   該細胞系衍生自WI-38細胞。WI-38細胞感染低滴度的SV40病毒,經(jīng)過連續(xù)傳代、克隆選擇獲得多株亞系,其中2RA亞系含有SV40 neo (T)和轉(zhuǎn)移抗原,從而改變其有限細胞系的特性,可在常規(guī)條件下連續(xù)傳代。該細胞系的實驗操作甚少在生物安全P2級條件下進行。   
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS   
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代  
傳代情況  C265  
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   
支原體檢測  陰性   
STR   STR鑒定  
同工酶    
染色體    
使用權(quán)限  A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4)如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
胰腺癌細胞  
胞介紹  
該細胞來源于一位40歲白人男性患者的肝轉(zhuǎn)移。細胞表達粘液素,Rh+, HLA A2,,A9,B13,B17。含有刺激素受體和乙二醇激素受體。  
細胞特性  
1)來源:胰腺癌,肝轉(zhuǎn)移  
2)形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細胞接受后的處理:  
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。  
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉谩?nbsp; 
細胞用途:僅供科研使用。  
人卵巢癌細胞  
人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞  
人卵巢透明細胞癌細胞  
細胞介紹  
ES-2細胞系建自45歲女性黑人的外科腫瘤標本。該腫瘤為低分化卵巢透明細胞癌。該細胞zui初生長在軟瓊脂中。在裸鼠中成瘤。該細胞對多種藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性。ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。  
細胞特性  
1)來源:透明細胞癌,卵巢  
2)形態(tài):成纖維細胞  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
人卵巢腺癌細胞  
細胞介紹  
OCAR-3細胞由T.C.Hamilton在1982年建系。取于患進行性卵巢腺癌病人的惡性腹水。NIH-OCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體,這對于激素治療的評估是有用的。  
細胞特性  
1)來源:卵巢  
2)形態(tài):上皮細胞樣  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
人子宮頸表皮癌細胞  
細胞介紹  
這株細胞是J. Sykes于1974年建立的(參考ATCC HTB-33)。 有報告稱MS751細胞含有人狀瘤病毒18 (HP-18)序列。后來發(fā)現(xiàn)MS751細胞包含HP-45基組的一部分,而其中E6/E7區(qū)域表達呈poly(A)+RNA的形式。

 



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