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上海莼試生物技術有限公司

主營產品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價格,ELISA試劑盒報價

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人胚腎細胞;293T
人胚腎細胞;293T
參考價 面議
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  • 所在地 上海市

更新時間:2017-06-06 09:24:27瀏覽次數:678

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【簡單介紹】
人胚腎細胞;293T收到細胞后7天,如發(fā)現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時銷售人員,我們將盡快為您解決。

公司是*的ATCC細胞供應商,提供人胚腎細胞;293T的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱  人胚腎細胞;293T  
形態(tài)特性   上皮樣  
生長特性  貼壁  
特征特性   該細胞由293tsA1609neo衍生而來,含有SV40大T抗原,用于逆轉錄病毒、基因表達和蛋白。   
培養(yǎng)條件    10%FBS,2mM L-glutamine,1% Penicillin/Streptomycin.  
傳代方法   1:3-1:8,每周換液2-3次  
傳代情況    
凍存條件   90%FBS+10%DMSO  
支原體檢測  培養(yǎng)法(-)指示細胞法(-)  
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D21S11:28,30.2;D3S1358:15,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;PentaD:9,10;PentaE:7,15;TH01:7,9.3;TPOX:11;VWA:16,19  
同工酶    
染色體    
使用權限  A類  培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質:細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質與體內基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。


作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
細胞介紹  
該細胞廣泛應用于染色體異常測試。。  
細胞特性  
1)  來源:中國倉鼠肺  
2)  形態(tài):成纖維細胞樣  
3)  含量:>1x106 個/mL  
4)  污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)  規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
倉鼠卵巢細胞  
胞介紹  
貼壁生長及懸浮生長均可(用于蛋白表達時,應使用懸浮生長狀態(tài),此時細胞生長狀態(tài)更好,比表面積更高,生物反應器中的傳質、傳熱效率更高,同時也可提高生物反應器空間使用效率。工業(yè)上大規(guī)模單抗,重組蛋白,大部分使用懸浮培養(yǎng)法來)  
細胞特性  
1)來源:中國倉鼠  
2)形態(tài):成纖維細胞樣  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
倉鼠卵巢細胞  
細胞介紹  
Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C,ATCC)是從缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉移酶,從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。對于研究N-連接糖基化改變對內源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉染產生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響,這些細胞十分有用。  
細胞特性  
1)來源:倉鼠卵巢  
2)形態(tài):上皮細胞樣  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:使用含有優(yōu)質胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入使用的培養(yǎng)基后轉移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
豬鼻甲黏膜成纖維細胞  
豬肺泡巨噬細胞  
細胞介紹  
母細胞3D4來源于pSV3neo質粒轉染豬原代肺泡巨噬細胞得到的。該克隆通過G418篩選得到。  
細胞特性  
1)來源:豬肺  
2)形態(tài):巨噬細胞樣,貼壁生長  
3)含量:>1x106 個/mL  
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
細胞接受后的處理:  
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。  
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。  
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。  
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得。  
細胞用途:僅供科研使用。  
豬腎細胞  
猴胚胎腎上皮細胞  
細胞特性  
1)來源:腎  
2)含量:>1x106 個/mL  
3)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性  
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝  
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。  
 



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