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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:21:47瀏覽次數(shù):395

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【簡(jiǎn)單介紹】
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1,收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)
細(xì)胞名稱     水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S1        
形態(tài)特性      成纖維細(xì)胞樣        
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)        
特征特性      該細(xì)胞系來(lái)源于一雌性河川型水牛與沼澤型水牛雜交后代的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS        
傳代方法      1:2傳代;3-4天一次        
傳代情況     P2        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測(cè)     熒光法(-)         
STR      -        
同工酶             
染色體             
使用權(quán)限     A類    
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。

4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

OLA1     cDNA    Rat    大鼠 OLA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRRC1     cDNA    Rat    大鼠 PRRC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TPI1     cDNA    Rat    大鼠 TPI1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HNRNPC     cDNA    Rat    大鼠 HNRNPC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EHD3     cDNA    Rat    大鼠 EHD3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ITFG1     cDNA    Rat    大鼠 ITFG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ATP5A1     cDNA    Rat    大鼠 ATP5A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ACO2     cDNA    Rat    大鼠 ACO2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
AQP9     cDNA    Rat    大鼠 AQP9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GPX3     cDNA    Rat    大鼠 GPX3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CYP4A3     cDNA    Rat    大鼠 CYP4A3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SLC25A17     cDNA    Rat    大鼠 SLC25A17 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SERPINB3A     cDNA    Rat    大鼠 SERPINB3A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RASSF7     cDNA    Rat    大鼠 RASSF7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FAH     cDNA    Rat    大鼠 FAH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
GLB1     cDNA    Rat    大鼠 GLB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
     cDNA    Rat    大鼠 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HMGCS2     cDNA    Rat    大鼠 HMGCS2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGA     cDNA    Rat    大鼠 FGA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MAGED2     cDNA    Rat    大鼠 MAGED2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RASSF6     cDNA    Rat    大鼠 RASSF6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
WDPCP     cDNA    Rat    大鼠 WDPCP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALDH1A7     cDNA    Rat    大鼠 ALDH1A7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ASF1B     cDNA    Rat    大鼠 ASF1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ASS1     cDNA    Rat    大鼠 ASS1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
COMMD10     cDNA    Rat    大鼠 COMMD10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TAF12     cDNA    Rat    大鼠 TAF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ANKRA2     cDNA    Rat    大鼠 ANKRA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EEF1A1     cDNA    Rat    大鼠 EEF1A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SEP15     cDNA    Rat    大鼠 SEP15 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FSTL1     cDNA    Rat    大鼠 FSTL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UQCRC2     cDNA    Rat    大鼠 UQCRC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CTSH     cDNA    Rat    大鼠 CTSH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRRG4     cDNA    Rat    大鼠 PRRG4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HMGCL     cDNA    Rat    大鼠 HMGCL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DCPS     cDNA    Rat    大鼠 DCPS 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ARL1     cDNA    Rat    大鼠 ARL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ATP6V1C1     cDNA    Rat    大鼠 ATP6V1C1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RCN3     cDNA    Rat    大鼠 RCN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TAGLN2     cDNA    Rat    大鼠 TAGLN2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SUCLA2     cDNA    Rat    大鼠 SUCLA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TMEM150A     cDNA    Rat    大鼠 TMEM150A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
UFD1L     cDNA    Rat    大鼠 UFD1L 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 



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