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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間：2017-06-01 09:14:08瀏覽次數(shù)：369
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供長尾綠猴胚胎細(xì)胞；4179的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細(xì)胞名稱 長尾綠猴胚胎細(xì)胞；4179
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞，上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
IL8 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL8 基因全長ORF克隆
IL1R1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 基因全長ORF克隆
ADAM8 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ADAM8 基因全長ORF克隆
GPR44 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GPR44 基因全長ORF克隆
PTGFRN cDNA Cynomolgus 食蟹猴 PTGFRN 基因全長ORF克隆
IL6ST cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST 基因全長ORF克隆
CD4 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD4 基因全長ORF克隆
FAS cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FAS 基因全長ORF克隆
ART4 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ART4 基因全長ORF克隆
ART1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ART1 基因全長ORF克隆
CD86 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD86 基因全長ORF克隆
NCR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 NCR1 基因全長ORF克隆
CD80 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD80 基因全長ORF克隆
TNFSF13B cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TNFSF13B 基因全長ORF克隆
ATP1B3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ATP1B3 / LOC716682 基因全長ORF克隆
IL2RA cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 基因全長ORF克隆
CD300LB cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD300LB 基因全長ORF克隆
IFITM1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 IFITM1 基因全長ORF克隆
TLR8 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR8 基因全長ORF克隆
TLR9 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR9 基因全長ORF克隆
ENPEP cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ENPEP 基因全長ORF克隆
TLR3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR3 基因全長ORF克隆
TLR4 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR4 基因全長ORF克隆
TLR10 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR10 基因全長ORF克隆
TLR6 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR6 基因全長ORF克隆
TLR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR1 基因全長ORF克隆
TLR2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TLR2 基因全長ORF克隆
TFRC cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TFRC 基因全長ORF克隆
ABCG2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ABCG2 基因全長ORF克隆
CD274 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆
BTLA cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BTLA 基因全長ORF克隆
PDCD1LG2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 PDCD1LG2 基因全長ORF克隆
CD247 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD247 基因全長ORF克隆
LAMP3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 基因全長ORF克隆
CD226 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD226 基因全長ORF克隆
PRNP cDNA Cynomolgus 食蟹猴 PRNP 基因全長ORF克隆
TSPAN7 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TSPAN7 基因全長ORF克隆
ENPP3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ENPP3 基因全長ORF克隆
CCR7 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CCR7 基因全長ORF克隆
CXCR5 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CXCR5 基因全長ORF克隆
CCR9 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CCR9 基因全長ORF克隆
CXCR3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CXCR3 基因全長ORF克隆
CCR4 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CCR4 基因全長ORF克隆
