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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間：2017-06-01 08:45:16瀏覽次數(shù)：348
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細(xì)胞名稱 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源自CV-1細(xì)胞株，經(jīng)轉(zhuǎn)染編碼野生型T抗原、起始點(diǎn)缺陷突變的SV40得到；細(xì)胞中整合有SV40基因組完整早期區(qū)段的單個(gè)拷貝。該細(xì)胞表達(dá)T抗原，適用于需要SV40T抗原表達(dá)的載體的轉(zhuǎn)染；保留SV40溶細(xì)胞性生長的特性；支持40℃時(shí)溫度敏感性A209病毒的復(fù)制；支持早期區(qū)段缺失的SV40純體的復(fù)制。因含有SV40的DNA序列，該細(xì)胞需要在*中操作。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體 99-110
使用權(quán)限 A類
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞；COS-1實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
VSIG4 cDNA Human 人 VSIG4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
ITGAV cDNA Human 人 ITGAV 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IFNG cDNA Ferret 雪貂 IFNG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
AMD1 cDNA Human 人 AMD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CD3E cDNA Ferret 雪貂 CD3E 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
FST cDNA Human 人 Follistatin 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IDH1 cDNA Human 人 IDH1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
SPRY1 cDNA Human 人 SPRY1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
CR2 cDNA Human 人 CR2 / CD21 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
HSP90AA1 cDNA Human 人 HSP90AA1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
NP cDNA H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Memphis/1/68) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
NP cDNA H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Brevig Mission/1/1918) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
M1 cDNA H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/2003) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
