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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-01 08:35:50瀏覽次數(shù):583
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細(xì)胞名稱 團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 團(tuán)頭魴細(xì)胞由長(zhǎng)江水產(chǎn)所建立鑒定,用于鯉尾鰭魚基礎(chǔ)研究和病毒疾病防治研究。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞;WCF 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間 以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
FETUB cDNA Human 人 FETUB 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
FGF23 cDNA Human 人 FGF23 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
IL20 cDNA Human 人 IL20 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD1B cDNA Human 人 CD1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
IL22 cDNA Human 人 IL22 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
IL3 cDNA Human 人 IL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
KLK4 cDNA Human 人 KLK4 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CASP14 cDNA Human 人 CASP14 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
TNFSF18 cDNA Human 人 TNFSF18 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
TSHB cDNA Human 人 TSHB 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
HIST1H3A cDNA Human 人 HIST1H3A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
KIR2DL4 cDNA Human 人 KIR2DL4 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
NOXA1 cDNA Human 人 NOXA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CCR1 cDNA Human 人 CCR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
IL9R cDNA Human 人 IL9R 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
EDA2R cDNA Human 人 EDA2R 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CDK10 cDNA Human 人 CDK10 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
LY9 cDNA Human 人 LY9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
TERF1 cDNA Human 人 TERF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
PIK3R1 cDNA Human 人 PIK3R1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
SELL cDNA Human 人 SELL 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CCNE2 cDNA Human 人 CCNE2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CEACAM8 cDNA Human 人 CEACAM8 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD207 cDNA Human 人 CD207 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
ITLN1 cDNA Human 人 ITLN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD300C cDNA Human 人 CD300C 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
GH2 cDNA Human 人 GH2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)