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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間：2017-06-01 08:30:25瀏覽次數(shù)：385
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細(xì)胞名稱 昆蟲卵巢細(xì)胞；Sf21
形態(tài)特性 圓形，多形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織，是Sf9細(xì)胞的克隆系，可以用于昆蟲病毒的基礎(chǔ)研究和復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體。
培養(yǎng)條件 Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C11
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
昆蟲卵巢細(xì)胞；Sf21實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后，將動物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
毒 hRSV (subtype A, strain A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化) (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
RSV-G cDNA Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain A2) glycoprotein G / RSV-G 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化) (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SCAMP3 cDNA Human 人 SCAMP3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
KDM1A cDNA Human 人 KDM1A / KDM1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
VASH1 cDNA Human 人 VASH1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
DLL1 cDNA Human 人 DLL1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
MYC cDNA Human 人 MYC 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
JAK2 cDNA Human 人 JAK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
FLT4 cDNA Human 人 VEGFR3 / FLT4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
IL2RG cDNA Rat 大鼠 IL2RG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
DLL1 cDNA Mouse 小鼠 DLL1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
CXCR2 cDNA Mouse 小鼠 CXCR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
MSR1 cDNA Human 人 SR-A / MSR1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
METAP2 cDNA Human 人 METAP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CSF2 cDNA Human 人 GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CAV1 cDNA Human 人 CAV1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IL2RB cDNA Mouse 小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FOLR1 cDNA Mouse 小鼠 FOLR1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TP53 cDNA Mouse 小鼠 P53 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
VEGFC cDNA Mouse 小鼠 VEGF-C 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CXCL5 cDNA Mouse 小鼠 CXCL5 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
HNRNPK cDNA Human 人 HNRNPK 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
IDO2 cDNA Human 人 IDO2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
SIRT4 cDNA Human 人 SIRT4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CLU cDNA Human 人 CLU 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
