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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞；HFTF 的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱     人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞；HFTF        
形態(tài)特性      成纖維細(xì)胞樣         
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)         
特征特性      北京眼科研究所建系。         
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS         
傳代方法      1:2~1:3傳代；3~4天1次。        
傳代情況     P9        
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS         
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法（-）         
STR               
同工酶             
染色體      46,XX        
使用權(quán)限     A類        
 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。

IL33     MAb    Human    IL-33 兔單抗 (FITC)     FCM   
IL33     MAb    Human    IL-33 兔單抗 (PE)     FCM   
FLT1     MAb    Human    VEGFR1 / FLT-1 兔單抗 (PE)     FCM   
FLT1     MAb    Human    VEGFR1 / FLT-1 兔單抗 (FITC)     FCM   
SPARCL1     MAb    Human    SPARCL1 兔單抗 (PE)     FCM   
SPARCL1     MAb    Human    SPARCL1 兔單抗 (FITC)     FCM   
AGT     MAb    Human    Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 兔單抗 (PE)     FCM   
CRABP2     MAb    Human    CRABP2 兔單抗 (FITC)     FCM   
CRABP2     MAb    Human    CRABP2 兔單抗 (PE)     FCM   
ESAM     MAb    Human    ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 兔單抗 (PE)     FCM   
MET     MAb    Human    c-MET / HGFR 兔單抗 (PE)     FCM   
MET     MAb    Human    c-MET / HGFR 兔單抗 (FITC)     FCM   
MET     MAb    Human    c-MET / HGFR 兔單抗 (FITC)     FCM   
MET     MAb    Human    c-MET / HGFR 兔單抗 (PE)     FCM   
CD34     MAb    Mouse    CD34 兔單抗 (PE)     FCM   
GBA3     MAb    Human    GBA3 兔單抗 (PE)     FCM   
EPCAM     MAb    Human    EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 兔單抗 (FITC)     FCM   
IL13RA1     MAb    Human    IL-13RA1 / CD213a1 兔單抗 (PE)     FCM   
EPCAM     MAb    Human    EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 兔單抗 (PE)     FCM   
BACE1     MAb    Human    BACE1 / ASP2 兔單抗 (PE)     FCM   
CASP14     MAb    Human    Caspase-14 / CASP14 兔單抗 (PE)     FCM   
MCAM     MAb    Human    CD146 / MCAM 兔單抗 (PE)     FCM   
LXN     MAb    Human    Latexin / Lxn 兔單抗 (FITC)     FCM   
SERPINF2     MAb    Human    SerpinF2 兔單抗 (FITC)     FCM   
P4HB     MAb    Human    P4HB 兔單抗 (FITC)     FCM   
PPM1G     MAb    Human    PPM1G 兔單抗     IHC-P   
TXN     MAb    Human    Thioredoxin / TXN 兔單抗     IHC-P   
CST3     MAb    Human    Cystatin C / CST3 兔單抗     IHC-P   
CD38     MAb    Human    SCARB3 兔單抗     IHC-P   
CDH17     MAb    Human    Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 兔單抗     IHC-P   
S100P     PAb    Human    S100P 兔單抗     IHC-P   
CEACAM1     MAb    Mouse    CEACAM1 / CD66a 兔單抗     IHC-P   
S100A9     MAb    Human    S100A9 兔單抗     IHC-P   
UCHL3     MAb    Mouse    UCHL3 兔單抗     IHC-P   
ACY1     MAb    Human    ACY1 / Aminoacylase-1 兔單抗     IHC-P   
ACE2     MAb    Rat    ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 兔單抗     IHC-P   
AGO2     MAb    Mouse    AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 兔單抗     IHC-P   
ASGR1     MAb    Mouse    ASGPR1 / ASGR1 兔單抗     IHC-P   
CXADR     MAb    Mouse    CXADR 兔單抗     ELISA IHC-P   
AFP     MAb    Human    AFP / alpha-fetoprotein 兔單抗     IHC-P   
CEACAM5     MAb    Human    CEACAM5 / CD66e 兔單抗     IHC-P   
CNDP2     MAb    Mouse    CNDP2 兔單抗     IHC-P   
AGT     MAb    Human    Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 兔單抗     IHC-P   
B2M     MAb    Human    B2M / beta-2 microglobulin 兔單抗     IHC-P   
CA9     MAb    Mouse    Carbonic Anhydrase IX / Car9 兔單抗     IHC-P   
ICAM3     MAb    Human    CD50 / ICAM-3 兔單抗     IHC-P   
ICAM3     MAb    Human    CD50 / ICAM-3 兔單抗     IHC-P