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上海莼試生物技術(shù)有限公司

主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,ELISA試劑盒價(jià)格,ELISA試劑盒報(bào)價(jià)

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大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)Elisa試劑盒使用說明書

2017-6-8  閱讀(354)

提 供 商 上海莼試生物技術(shù)有限公司 資料大小 45.6KB
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【詳細(xì)說明】

大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠磷酸化 AKT 蛋白(P-AKT)水平。用純化
的大鼠磷酸化 AKT 蛋白(P-AKT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入磷酸化AKT 蛋白(P-AKT) ,再與HRP 標(biāo)記的磷酸化AKT 蛋白(P-AKT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷酸化AKT 蛋白(P-AKT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠磷酸化AKT 蛋白(P-AKT)濃度
大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)Elisa試劑盒操作步驟 
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
80ng/L  5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
40ng/L  4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
20ng/L  3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
10ng/L  2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
5ng/L  1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品  150µl的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同) 、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。 在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl, 待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,
然后再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。     
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5次,拍干。 
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。   
7. 溫育:操作同3。 
8. 洗滌:操作同5。 
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘. 
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色) 。 
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4,TIMP-4 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,TIMP-3 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,TIMP-2 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human Oncostatin-M,OSM ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T
人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒     進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human Surfactant Protein A,SP-A ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人轉(zhuǎn)酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    human tranGSlutaminase 2C polypeptide,TGM2 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    英文名稱:    Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/原裝    英文名稱:    Human Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit    大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)Elisa試劑盒規(guī)格:    96T/48T

 



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