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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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大鼠肝X受體β（LXRβ）elisa試劑盒測定中試劑準備
2020-11-5 閱讀(208)
大鼠肝X受體β（LXRβ）elisa試劑盒測定中試劑準備：
在實驗開始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20分鐘以上后，再 進行測定，證試劑盒溫度要和室溫一致。如果把試劑盒從冰箱拿出來直接做實驗會造成一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。因為在后面的孵育反應(yīng)步驟中，造成孵育時間不夠。其次，ELISA實驗中洗板用的洗液需每日更換配制，稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。
加血清樣本及反應(yīng)試劑
血清樣本使用微量加樣槍加樣。使用微量加樣槍加樣必須注意避免以下幾點： 1） 加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。需勻速加樣，吸樣時，加樣槍需按到一檔，加樣時，加樣槍需直接按到底。 2） 加樣應(yīng)直接加入反應(yīng)孔底部，加在反應(yīng)孔孔壁上易濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。盡量避免出現(xiàn)氣泡。 3） 反應(yīng)試劑的加入時先要注意試劑的有效期，再注意滴加的角度和滴加的速度。滴加太快易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
