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上海莼試生物技術(shù)有限公司

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小鼠elisa試劑盒分光光度計定量測定操作

2018-7-5  閱讀(343)

在運用小鼠elisa試劑盒方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經(jīng)洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經(jīng)孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測抗體的量,其結(jié)果可用目測或用分光光度計定量測定。

操作步驟:

1.將抗原按5 μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6),100 μl /孔,4℃過夜。

2.次日PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

3.加2%BSA封閉室溫1 h,200 μl /孔。

4.陽性對照從10ug/ml,做倍必稀釋,待測血清從1:50做倍比稀釋,預(yù)試驗后確定稀釋倍數(shù)及陽性對照的起始濃度及稀釋數(shù)量(以可以做標準曲線為參數(shù)),室溫1h。

5.PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

6.加入1:3000(不同公司有不同的稀釋度) PBS-T稀釋的HRP標記的山羊抗人IgG,100 μl /孔,室溫1h。

7.PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。

8.小鼠elisa試劑盒顯色,100 μl /孔,顏色變深后中止顯色,2M硫酸在BIO-RAD酶標儀上讀數(shù),可用ABTS,OPD,TMB等

UV法含量測定用 馬來酸 對照品 171250-200401 50mg

HPLC法含量測定用 對照品 171252-200401 50mg

HPLC法含量測定 對照品 171253-200401 100mg

TLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(雜質(zhì)B) 對照品 171254-200401 100mg

鑒別 鹽酸 對照品 171256-200401 100mg

含量測定 銀杏酸 對照品 20mg

Oleuropein 橄欖苦苷 橄欖苦甙 32619-42-4 HPLC≥98% 20mg/支

Lobetyolin 黨參炔苷 黨參炔甙 136085-37-5 HPLC≥98% 10mg/支

Carnosic acid 鼠尾草酸 639426 HPLC≥98% 20mg/支
小鼠elisa試劑盒



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