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小鼠可溶性瘦素受體(sLR)elisa試劑盒操作步驟

2022-8-16  閱讀(118)

小鼠可溶性瘦素受體(sLR)elisa試劑盒操作步驟


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

JAK和微管相互作用蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:JAKMIP2

活化蛋白激酶B抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:JunB

凋亡細胞清除受體抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:JMJD6

磷酸化原癌基因c-Jun抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:phospho-c-Jun

Notch配體Jagged 2蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Jagged 2

組蛋白去甲基化Jarid1C抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Jarid1C

組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移酶JMJD1B抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:JMJD1B

親聯(lián)蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Junctophilin-2

驅(qū)動蛋白家族蛋白13B抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIF13B

驅(qū)動蛋白家族蛋白7抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIF7

CREB結(jié)合蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KAT3A

腦蛋白9抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KNDC1

絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Kindlin 2

鋅指蛋白393抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KLF17

組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KDM1

驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KIF11

組蛋白甲基化KMT3B抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KMT3B

離子通道蛋白Kv4.3抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Kv4.3

Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:KLLN 

賴氨酸t(yī)RNA的連接酶抗體現(xiàn)貨供應(yīng)英文名稱:Lysyl tRNA synthetase




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