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白介素elisa試劑盒操作程序

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所  在  地鹽城市

更新時間:2022-06-15 16:09:06瀏覽次數:673次

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白介素elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。

白介素elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。

白介素elisa試劑盒操作程序:

1、棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。

2、每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.。

3、取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

4、測定:以空白孔調零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

5、根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

白介素elisa試劑盒使用須知:

1、白介素elisa試劑盒檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩(wěn)定20分鐘左右。

2、檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。

3、實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩(wěn)定。

4、盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數據的準確性。

5、底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。

6、白介素elisa試劑盒實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。

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