試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
胰島素elisa試劑盒的設(shè)計使用了高純度的抗體。三明治夾心法ELISA試劑盒,均經(jīng)過單克隆抗體和多克隆抗體對的篩選,并尋找出能特異性檢測目標物的較好抗體對組合。經(jīng)挑選后的抗體對需經(jīng)過滴定實驗,挑選出能得到較好結(jié)果的抗體對濃度。在研發(fā)的過程中,不同濃度的捕獲抗體包被在微孔板上進行實驗,從而挑選出結(jié)合力較強和精確度較高的捕獲抗體濃度。接下來,進行不同濃度的檢測抗體篩選實驗,挑選出能與捕獲抗體配對并表現(xiàn)較好信噪比的檢測抗體濃度。
胰島素elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
胰島素elisa試劑盒注意事項
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準、
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。