血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分。
Gibco胎牛血清
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。
血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成(稱為必需氨基酸),必須由培養(yǎng)液提供。血清激素有胰島素、生長(zhǎng)激素等及多種生長(zhǎng)因子(如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子等);血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì),能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。
Gibco胎牛血清使用中的注意事項(xiàng):
1、血清儲(chǔ)存和解凍:建議血清保存在-20℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。血清解凍,將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融(建議:融解過程中不時(shí)規(guī)則地?fù)u晃均勻)、
2、如何選擇血清:血清產(chǎn)品因牛個(gè)體、環(huán)境變化批次間存在較大差異,選擇血清產(chǎn)品要看重批次,國外*有品牌優(yōu)勢(shì),但也不是每批產(chǎn)品都值得信賴。李記血清,每一批次都要進(jìn)行多項(xiàng)指標(biāo)測(cè)試,并由專業(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行十余種養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)后才推向市場(chǎng),我們zui大程度的確保產(chǎn)品批次間穩(wěn)定,提高實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性。
3、哪些原因容易導(dǎo)致血清產(chǎn)生沉淀:1)溫度改變太大,血清由-20℃直接放入37℃解凍,因溫度改變劇烈容易導(dǎo)致沉淀;2)血清放置37℃時(shí)間太久,血清中的不穩(wěn)定成分會(huì)被破壞,導(dǎo)致血清品質(zhì)變差,也會(huì)產(chǎn)生沉淀;3)血清分裝凍存時(shí),注意在不產(chǎn)生氣泡的情況下?lián)u晃均勻,避免因成分不均勻?qū)е虏糠盅宄煞譂舛雀淖儺a(chǎn)生沉淀;4)血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請(qǐng)按56℃,30分鐘,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
4、血清是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí))建議滅活,在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅活血清。
5、無血清培養(yǎng)基:無血清培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),但是,血清仍然是培養(yǎng)液中zui基本的添加物,尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成無血清培養(yǎng)液。