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重組純化蛋白A、G的主要應(yīng)用

時(shí)間:2018-2-28閱讀:338
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    重組純化蛋白ARecomb Protein A), 蛋白A是從AStreptococci細(xì)菌中分離出來(lái)的胞壁蛋白,與多數(shù)哺乳動(dòng)物的IgG Fc段結(jié)合(包括:人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠等)。不與狗IgG結(jié)合、不結(jié)合人IgMIgD、和IgA。重組蛋白GRecomb Protein G)已經(jīng)除去了與白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn),減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合。因此,它比天然蛋白G和蛋白A有更大的親和力??梢源娑?,廣泛應(yīng)用于免疫化學(xué)等領(lǐng)域。在親和力、穩(wěn)定性等方面好。蛋白A是從非致病性Bacillus中獲取的通過(guò)基因工程生產(chǎn)的重組蛋白,其性質(zhì)和重組蛋白G相似。

    重組純化蛋白G Recomb Protein G ),蛋白G是從GStreptococci細(xì)菌中分離出來(lái)的胞壁蛋白,與多數(shù)哺乳動(dòng)物的IgG Fc段結(jié)合(包括:人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠等)。不與狗IgG結(jié)合、不結(jié)合人IgM、IgD、和IgA。重組蛋白GRecomb Protein G)已經(jīng)除去了與白蛋白及細(xì)胞表面結(jié)合位點(diǎn),減少了交叉反應(yīng)和非特異性結(jié)合。因此,它比天然蛋白G和蛋白A有更大的親和力。可以代替二抗,廣泛應(yīng)用于免疫化學(xué)等領(lǐng)域。在親和力、穩(wěn)定性等方面好。

    蛋白A、蛋白G是微生物來(lái)源的天然蛋白質(zhì),可以和哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白結(jié)合,基于這一特性,蛋白A、蛋白G的主要應(yīng)用是在:
1 純化抗體: 將這些蛋白偶聯(lián)于支持物上,提供了純化抗體的有效方法。
2 免疫沉淀(immunoprecipitation: 利用蛋白A、蛋白G和免疫球蛋白的Fc段的結(jié)合,把Ag-Ab復(fù)合物分離出來(lái),從而達(dá)到從蛋白復(fù)合物中分離出特定蛋白進(jìn)行下一步的研究分析或者研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)之間的相互作用。
3 去除或減少非特異性背景: 如免疫沉淀技術(shù)中在加入特異性抗體前加protein A/G beads到細(xì)胞裂解液中,以減低背景。
  

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