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上海懋康生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海懋康生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)研究>>蛋白抽提與定量>> MP1903-500TBradford Protein Quantification Kit Bradford

Bradford Protein Quantification Kit Bradford

參  考  價(jià):130
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    MP1903-500T

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠(chǎng)商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

500T 130元 1件可售

更新時(shí)間:2024-06-20 11:36:26瀏覽次數(shù):488次

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目前的蛋白濃度檢測(cè)方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。與蛋白濃度測(cè)定的其他方法(比如:BCA法和Lowry法)相比,Bradford法更簡(jiǎn)單、更穩(wěn)定、兼容性更好。Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,尤其是還原劑的影響。樣品中β-巰基乙

Bradford Protein Quantification Kit

Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

MP1903-500T

500T

135

Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

MP1903-1000T

1000T

190

Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

MP1903-2500T

2500T

410


產(chǎn)品描述

目前,的蛋白濃度檢測(cè)方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)。與蛋白濃度測(cè)定的其他方法(比如:BCA法和Lowry法)相比,Bradford法更簡(jiǎn)單、更穩(wěn)定、兼容性更好。Bradford法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,尤其是還原劑的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,DTT的濃度可高達(dá)5mM,但本法受高濃度去垢劑的影響明顯,需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20、60、80低于0.015%。含高濃度去污劑的蛋白定量,建議采用BCA蛋白定量試劑盒(MP1902-500T)。


本Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)的檢測(cè)原理是:在酸性乙醇溶液中,考馬斯亮藍(lán)G250(Coommassie Brilliant Blue G250)與蛋白結(jié)合顏色由棕色變?yōu)樗{(lán)色,溶液的吸收峰從465nm遷移到595nm,顏色的變化與蛋白濃度成正比,因此,可通過(guò)檢測(cè)595nm處的吸光度對(duì)溶液中蛋白濃度進(jìn)行測(cè)定。本試劑盒檢測(cè)速度很快,少量樣品一般只需10min即可完成檢測(cè),檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml,最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg,待測(cè)樣品體積為1~20μl,在50~1000 μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線(xiàn)性關(guān)系。


產(chǎn)品組分

組分編號(hào)

組分名稱(chēng)

產(chǎn)品貨號(hào)(規(guī)格)

儲(chǔ)存方法

MP1903-500T

MP1903-1000T

MP1903-2500T

MP1903-A

G250染色液

100ml

200ml

500ml

室溫

MP1903-B

蛋白標(biāo)準(zhǔn)BSA

20mg

20mg

20mg

室溫

MP1903-C

蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液

5ml

10ml

10ml

室溫


保存與運(yùn)輸方法

保存:室溫保存,1年有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)置于-20℃保存。

運(yùn)輸:室溫運(yùn)輸。


自備材料

1. 酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)、96孔板或比色杯、離心機(jī)、離心管

2. 蒸餾水、0.9% NaCl或PBS


使用方法

1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

1.1 取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液加入到20mg蛋白標(biāo)準(zhǔn)BSA中,充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃長(zhǎng)期保存。

1.2 取適量20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn),稀釋至終濃度為0.5mg/ml或所需濃度。例如取25μl 20mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn),加入975μl稀釋液,充分混勻,即可配制成0.5mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)?!咎貏e提示】:待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。但為了簡(jiǎn)便起見(jiàn),一般也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋后的0.5mg/ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)可以-20℃長(zhǎng)期保存。


2. 蛋白濃度的測(cè)定

2.1 將標(biāo)準(zhǔn)品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板或EP管中,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足至20μl,相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

2.2 加適當(dāng)體積樣品到96孔板或EP管中。如果樣品不足20μl,加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl,需注意記錄樣品體積。

2.3 各孔加入200μlG250染色液,室溫放置3~5min。

2.4 酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)測(cè)定595nm波長(zhǎng)處的吸光度(OD值),如無(wú)595nm,560~610nm波長(zhǎng)范圍的吸光度也可。

2.5 根據(jù)BSA標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度(減去標(biāo)準(zhǔn)品中空白孔的OD值即最終的讀數(shù)),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和使用樣品體積計(jì)算樣品的蛋白濃度。


注意事項(xiàng)

1) G250染色液回復(fù)至室溫充分混勻后使用,有利于提高檢測(cè)的靈敏度,加完G250染色液后,盡量在30min內(nèi)完成吸光度的測(cè)定,防止沉淀形成后影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2) 蛋白標(biāo)準(zhǔn)在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)。

3) 待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否則待測(cè)蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測(cè)定不準(zhǔn)確。

4) 建議每次測(cè)定都做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。因?yàn)闇y(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深,并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度,否則如需精確測(cè)定宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

5) 如果沒(méi)有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定,但應(yīng)考慮根據(jù)比色杯的最小檢測(cè)體積。應(yīng)按比例適當(dāng)加大G250染色液、樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量使總體積不小于最小檢測(cè)體積,使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí),每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。

6) 用比色杯測(cè)定蛋白含量時(shí),由于考馬斯亮藍(lán)易結(jié)合石英比色杯,應(yīng)優(yōu)先選用一次性塑料比色杯,如用玻璃比色杯,比色完畢后應(yīng)立即用乙醇清洗干凈。

7) 試劑開(kāi)封后請(qǐng)盡快使用,以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。

8) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

MP1901-10ML

Bovine Serum Albumin Standard BSA標(biāo)準(zhǔn)品(5 mg/ml)

10ml

MP1902-500T

Enhanced BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(增強(qiáng)型)

500T

MP1903-500T

Bradford Protein Quantification Kit Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

500T

MP1501-100ML

RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液(強(qiáng))

100ml

MP1504-100ML

Lysis Buffer for WB/IP Assays免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

100ml

 

 



— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒

 Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒


上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


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