Fluo-4, AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級(jí)chun

— — Ca²⁺綠色熒光探針Fluo-3的升級(jí)版本

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Fluo-4 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針，超級(jí)chun；Fluo-4, Acetoxymethyl Ester; 可見光激發(fā)波長(zhǎng)Ca²⁺熒光探針；Fluo-3；Fluo-8, AM；Rhod-2, AM；CAS NO：273221-67-3；

Fluo-4是可見光激發(fā)波長(zhǎng)Ca²⁺熒光探針Fluo-3的改良版本，通過將Fluo-3結(jié)構(gòu)上的氯離子（Cl^-）替換為電子吸引力更強(qiáng)的氟離子（F^-），使得zui大激發(fā)波長(zhǎng)往短波長(zhǎng)偏移10nm左右。正由于這個(gè)波長(zhǎng)更接近氬激光器的波長(zhǎng)，則當(dāng)使用氬激光器來激發(fā)探針Fluo-4，能夠得到更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，比Fluo-3強(qiáng)一倍。另外，Fluo-4的Ca²⁺親和力幾乎接近Fluo-3（Fluo-3: Kd=0.4μM、Fluo-4: Kd=0.36μM），因此，使用上幾乎同Fluo-3。Ca²⁺結(jié)合后的zui大激發(fā)波長(zhǎng)為494nm，zui大發(fā)射波長(zhǎng)為516nm。可通過激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀來檢測(cè)胞內(nèi)鈣離子水平的變化。Fluo-4, AM是Fluo-4的一種乙酰甲酯衍生物，具有細(xì)胞膜滲透性，只需簡(jiǎn)單培養(yǎng)，即可輕易進(jìn)入細(xì)胞。一旦進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，即被其內(nèi)酯酶剪切生成不具膜滲透性的Fluo-4，從而滯留在胞內(nèi)以發(fā)揮相應(yīng)生理功能。

Fluo-4, AM相比較于Fluo-3的優(yōu)勢(shì)：

1. 激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)往短波長(zhǎng)偏移10nm，更接近氬激光器的波長(zhǎng)，。因此，當(dāng)使用488nm進(jìn)行熒光激發(fā)，得到更強(qiáng)的熒光信號(hào)，比Fluo-3強(qiáng)一倍。
2. 50μg小包裝供應(yīng)，使用方便，且能很好保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

Fluo-4, AM的應(yīng)用圖片：

Fig. 1, U2OS cells were seeded overnight at 40,000 cells per 100 µL per well in a 96-well black wall/clear bottom costar plate. The growth medium was removed, and the cells were incubated with 100 µl of 4 µM Fluo-3, AM or Fluo-4, AM in HHBS at 37 °C, 5% CO₂incubator for 1 hour. The cells were washed twice with 200 µl HHBS, then imaged with a fluorescence microscope using FITC channel.

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Fluo-4, AM 鈣離子熒光探針與細(xì)胞染色

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