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大鼠JNK1關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)ELISA試劑盒

時間:2017/4/11閱讀:324
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大鼠JNK1關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)ELISA試劑盒注意:收到我公司產(chǎn)品請*時間確認(rèn)試劑盒是否有破損,酶標(biāo)板是否封閉,使用前 TMB顯色液應(yīng)為無色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,或者其他問題請及時與我司售后人員進行,我們會*次安排進行退換。

報價,檢測原理,使用說明書,咨詢免費索要!

大鼠JNK1關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)ELISA試劑盒試劑盒特異性因素: 
1)固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此,在選擇試劑盒同時要對其使用的微孔板型號進行認(rèn)證,評估。 
2)包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測定尤其是間接ELISA中,試劑的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術(shù)條件的限制,包被用抗原或抗體的純度不可能達到100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能提高純度,提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。 
3)包被抗體的效價。具有高親和力和高特異性的包被抗體,是決定試劑特異性的重要方面。 
4 )封閉。是ELISA中重要的一步,目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙,減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。 

大鼠JNK1關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)ELISA試劑盒實驗測定具體步驟:
1.確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4.反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。 
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色,后 3-4 孔差別不明顯)。 
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。 
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測定 OD值。

大鼠JNK1關(guān)聯(lián)膜蛋白(JKAMP)ELISA試劑盒免疫染色固定液    100ml
免疫染色封閉液    100ml
免疫染色一抗稀釋液    100ml
免疫染色洗滌液    250ml
免疫熒光染色二抗稀釋液    100ml
免疫染色(非熒光)二抗稀釋液    100ml
Kisser封片液    10ml
Kisser封片液(phenol free)    10ml
PVP封片液    10ml
甘油明膠封片液    10ml
抗熒光淬滅PVP封片液    5ml
抗熒光淬滅封片液    5ml
抗熒光淬滅封片液(強)    5ml
免疫熒光染色試劑盒-抗大鼠Cy3    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗人FITC    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗山羊Cy3    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔Alexa Fluor 350    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔AMCA    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔Alexa Fluor 488    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔Alexa Fluor 555    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔Alexa Fluor 647    >300次
免疫熒光染色試劑盒-抗兔Cy3    >300次
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免疫熒光染色試劑盒-抗兔FITC    >300次
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免疫熒光染色試劑盒-抗小鼠AMCA    >300次

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