22RV1 (人前列腺癌細胞)

別稱 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R

種屬 人類

年齡（性別） 男性,成人

組織來源 前列腺

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述 22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細胞系；22RV1細胞系表達前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激22RV1細胞生長，經(jīng)Western Blot檢測溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應；EGF刺激22RV1細胞生長，但TGFβ-1不能抑制細胞生長；22RV1可在裸鼠中成瘤。

生物安全等級 2

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~40小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達情況 androgen receptor

注意事項 22RV1細胞復蘇時需要離心去除DMSO。凍存細胞復蘇最初階段，貼壁量少，成簇松散貼壁，但是最終細胞會變平并且擴散成很好的單層，這個過程需要4-5天時間。細胞生長緩慢，細胞只能生長到90%的匯合度。細胞凍存后復蘇成活率不高，推薦凍存液配比為90%血清+10% DMSO，使用優(yōu)質(zhì)血清。

注意事項：

1、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

2、收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。

3、由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。

4、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：

1、收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2、加入0.25％（w / v）0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3、將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：

1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.

2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

操作步驟：

步驟1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

步驟2：離心收集對數(shù)生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）

步驟3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細胞

步驟4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記

步驟5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉(zhuǎn)移至液氮長期保存

在沒有凍存盒或者非程序凍存液時，可以選擇手動梯度降溫。但手動梯度降溫不適用于所有細胞，且效果不穩(wěn)定，同樣需要先做凍存測試。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CCRF-CEM [CCRF CEM] (人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞)

A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)

AAV-293 (人胚腎細胞)

Acc-2 (人涎腺腺樣囊性癌細胞)

ACHN (人腎細胞腺癌細胞)

AGS (人胃腺癌細胞)

Ana-1 (小鼠巨噬細胞)

Anglne (人卵巢癌細胞)

AR42J (大鼠胰腺外分泌細胞)

ARPE-19 (人視網(wǎng)膜上皮細胞)

AsPC-1 (人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞)

AtT-20 (小鼠垂體瘤細胞)

B16 (小鼠黑色素瘤細胞)

Bcap-37 (人乳腺癌細胞)

BEL-7402 (人肝癌細胞)

豬腸三葉因子(ITF)ELISA檢測試劑盒

人淋巴毒suβ(LTB)檢測試劑盒

豬白介su3(IL-3)檢測試劑盒

倉鼠基質(zhì)金屬蛋白mei9/明膠meiB(MMP-9/Gelatinase B) 試劑盒 ELISA

豬藍耳病毒RT-PCR試劑盒

白鱘虹彩病毒PCR試劑盒

鮑球狀病毒PCR檢測試劑盒

內(nèi)氏放線菌PCR檢測試劑盒

阿爾萊特葡萄球菌PCR試劑盒

組織胞漿菌通用PCR試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物PAT基因PCR檢測試劑盒

22RV1 (人前列腺癌細胞)阿爾萊特葡萄球菌PCR試劑盒

1(RT-1狷羚皰疹病毒1型PCR試劑盒

錐蟲PCR試劑盒

非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒