冰凍切片快速抗原修復(fù)液(5X)免疫檢測

商品介紹：

本品是一種特別適合用于冰凍切片的快速抗原修復(fù)液，只需室溫孵育5分鐘即可完成對冰凍切片樣品使用多醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。

商品屬性：

細胞或組織用多醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。

本抗原修復(fù)液含有了廣泛使用的SDS等抗原修復(fù)試劑等，pH值約為7.4，可以快速有效地去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

通常石蠟切片都需進行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進行抗原修復(fù)處理?？乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進行抗原修復(fù)。從原理上來看，無論冰凍切片還是細胞爬片等，只要是用多醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

本產(chǎn)品特別適合用于冰凍切片的抗原修復(fù)并用于后續(xù)的免疫染色。

一個包裝的本產(chǎn)品可以配制成500毫升抗原修復(fù)液(1X)。按照每個片子需要10毫升抗原修復(fù)液(1X)計算，一個包裝的本產(chǎn)品可以用于50個樣品。按照每個片子需要5毫升抗原修復(fù)液(1X)計算，則一個包裝的本產(chǎn)品可以用于100個樣品。

注意事項：

1. 抗原修復(fù)過程可以使用的染色缸和染色架或郵寄夾進行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。

2. 本抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或Milli-Q水稀釋5倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)。

步驟和注意事項：?

準(zhǔn)備實驗環(huán)境：?確保實驗區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細胞凍存與復(fù)蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數(shù)：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格中的細胞數(shù)，?細胞壓中線時，?只計左側(cè)和上方者，?不計右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實驗室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：