免疫熒光試劑盒(山羊源一抗)(DyLight488)

商品介紹：

本試劑盒采用SABC系統(tǒng)，是專為免疫化學(xué)而設(shè)計(jì)的，用以顯示組織或細(xì)胞中的抗原分布。DyLight是一種近年來被廣泛應(yīng)用的新型熒光染料，由于具有很好的光譜寬度、更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，更高的光學(xué)耐受性（抗淬滅性）和特異性，對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優(yōu)勢，標(biāo)記的抗體比Cy2和FITC標(biāo)記的更亮，但背景更低；DyLight 488-SABC，將鏈霉親和素—生物su引入熒光系統(tǒng)，能進(jìn)一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488大吸收峰 493nm；大發(fā)射峰518nm。呈黃綠色。

商品屬性：

保存條件：4℃可保存一年，應(yīng)避免冷凍。

石蠟片染色步驟：

1. 切片脫蠟至水。

2. 根據(jù)需要選擇抗原修復(fù)方式及強(qiáng)度?？蔁嵝迯?fù)、酶修復(fù)或不修復(fù)。

3. 封閉：滴加稀釋的正常兔血清封閉液(稀釋比 1:10),室溫 20 分鐘。甩干，勿洗。

4. 滴加適當(dāng)稀釋的一抗(山羊IgG)，37℃孵育 1~2 小時(shí)或4℃過夜。PBS洗5分鐘×3次。

5. 滴加稀釋的生物su標(biāo)記兔抗山羊IgG(參考效價(jià)1:100),37℃孵育30分鐘。PBS洗5分鐘×3次。

6. 滴加稀釋的 SABC- DyLight 488(參考效價(jià) 1:200-800)，37℃孵育30分鐘。PBS洗5分鐘×4 次。

7. 水溶性封片劑(ZN2946)或抗熒光衰減封片劑(ZN1974)封片。熒光顯微鏡觀察

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：