雙顯色抗小鼠IgG免疫組化試劑盒(POD和FITC)

商品介紹： 本試劑盒適于一抗來源為小鼠的IgG類抗體，是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計(jì)的。鏈霉親和素同親和素一樣，對生物su分子有高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍，兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。免疫組化雙顯色試劑盒采用熒光素 FITC 及過氧化物酶 POD 標(biāo)記的鏈酶親和素（SABC-FITC+SABC-POD）。FITC 在 490-495nm 激發(fā)，在 520-530nm 發(fā)射熒光，在熒光顯微鏡下呈明亮黃綠色。SABC-POD 在加入顯色底物 DAB 顯示后，染色呈棕黃色。用戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可在同一張切片上用兩套顯示系統(tǒng)觀察。

商品屬性：

保存條件：4℃可保存一年，應(yīng)避免冷凍。

石蠟片染色步驟：

1. 石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。

2. 3%H2O2去離子水室溫孵育5-10分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性，PBS沖洗，5分鐘×3次。

3. 根據(jù)需要選擇抗原修復(fù)方式及強(qiáng)度?？蔁嵝迯?fù)、酶修復(fù)或不修復(fù)。

4. 封閉：滴加用稀釋后的正常山羊血清封閉液(稀釋比1:10)，37℃孵育30分鐘，甩干，勿洗。

5. 滴加一抗(小鼠IgG)，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。PBS沖洗，5分鐘×3次。

6. 滴加生物su化山羊抗小鼠IgG，37℃孵育30分鐘。PBS 沖洗，5分鐘×3次。

7. 滴加SABC-FITC(參考效價(jià)1:100)或SABC-POD(參考效價(jià)1:100)，37℃孵育30分鐘。PBS沖洗，5分鐘×3次。

8. 顯色液顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。顯色劑可選DAB(ZN1968)。自來水充分沖洗。

9. 根據(jù)需要進(jìn)行蘇木素(ZN1971)復(fù)染，染色時(shí)間為0.5-2分鐘。選用中性樹膠，水溶性封片劑(ZN2946)或抗熒光衰減封片劑(ZN1974)封片。

10. 結(jié)果觀察。熒光顯微鏡下有黃綠色顆粒者為陽性染色。普通光學(xué)顯微鏡下有棕黃色顆粒者為陽性染色。

步驟和注意事項(xiàng)：?

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境：?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔，?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細(xì)胞培養(yǎng)：?

準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?

取出保存于低溫下的細(xì)胞苗，?并加入培養(yǎng)基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?

將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中，?定期更換培養(yǎng)液。?

細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：?

細(xì)胞系的凍存是將生長較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?

細(xì)胞計(jì)數(shù)：?

制備細(xì)胞懸液，?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù)，?細(xì)胞壓中線時(shí)，?只計(jì)左側(cè)和上方者，?不計(jì)右側(cè)和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色，?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號，?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?

聚合酶鏈反應(yīng)（?PCR）?：?

準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?

在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液，?開始PCR反應(yīng)。?

PCR反應(yīng)的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?

轉(zhuǎn)染：?

準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?

制備轉(zhuǎn)染試劑，?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中，?與細(xì)胞混合均勻。?

處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞，?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?

在操作過程中，?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時(shí)登記購買耗材或試劑，?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產(chǎn)品：