目前進(jìn)口ELISA試劑盒仍在研討傍邊占有著干流地位,ELISA試劑盒的遍及使用使得試驗(yàn)愈加便利、經(jīng)濟(jì)和,ELISPOT技能的長(zhǎng)處也決議了它的開展?jié)摿?。LISPOT法來(lái)源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技能的延伸和開展。因?yàn)橛坞x的循環(huán)抗體或CK的半哀期不一樣,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官,傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能切當(dāng)?shù)姆从丑w內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國(guó)外的科研工作者依據(jù)ELISA技能的基本原理,建立了體外檢查特異性抗體排泄細(xì)胞和CK排泄細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑駁技能(ELISPOT)。跟著ELISPOT技能的不斷開展,它的優(yōu)勢(shì)也逐漸顯示出來(lái),下面將ELISPOT與ELISA法對(duì)比區(qū)別。
ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)顯色反響,在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度,與規(guī)范曲線比較得出可溶性蛋白總量。 ELISPOT 也是經(jīng)過(guò)顯色反響,在細(xì)胞排泄這種可溶性蛋白的相應(yīng)方位上閃現(xiàn)明晰可辨的斑駁,可直接在顯微鏡下人工計(jì)數(shù)斑駁或經(jīng)過(guò)核算機(jī)輔佐的剖析系統(tǒng)對(duì)斑駁進(jìn)行計(jì)數(shù), 1個(gè)斑駁代表1個(gè)細(xì)胞,從而核算出排泄該蛋白的細(xì)胞的頻率。(某些研討不只要測(cè)細(xì)胞因子生成量,還需檢查排泄此細(xì)胞因子的細(xì)胞頻率)
ELISPOT的來(lái)源可以追溯到1963年JerneELISA試劑盒等人創(chuàng)建的溶血空斑技能(hemo-lytic plaque forming cell assay ,HPF),這項(xiàng)技能可用于檢查并計(jì)數(shù)單個(gè)抗體形成細(xì)胞。跟著單克隆抗體技能的老練,1983年,Czerkinsky等選用此法檢查脾細(xì)胞中排泄特異性抗體的細(xì)胞數(shù),發(fā)現(xiàn)該辦法敏感性高簡(jiǎn)便易行。后來(lái),他們又用這種辦法定量剖析遭到有絲分裂原刺激的外周血中排IFN2γ的細(xì)胞數(shù)。
ELISA試劑盒隨后,用ELISPOT法在單細(xì)胞水平檢查排泄別的細(xì)胞因子(如IL-2 , IL-4 , IL-5 , IL-10 , TNFα和IL-6) 數(shù)量的手段也被建立起來(lái)。Nordstrom 等用*-抗*蛋白生物放大來(lái)進(jìn)步這種辦法的敏感性,Herr用核算機(jī)輔佐圖畫剖析系統(tǒng)(computer-assisted video image analysis ,ELISA試劑盒CVIA) 主動(dòng)剖析TNF2α酶聯(lián)免疫斑駁的巨細(xì)和數(shù)量,核算與負(fù)載抗原肽的靶細(xì)胞觸摸后外周血單核細(xì)胞(PBMC) 中抗原特異性CD8+T細(xì)胞的數(shù)量,ELISA試劑盒不光進(jìn)步了對(duì)布景染色的分辨力也使大規(guī)模研討成為可能。Vaquerano等將數(shù)碼相機(jī)和核算機(jī)起來(lái),開宣布相似的斑駁計(jì)數(shù)系統(tǒng),認(rèn)為當(dāng)每孔斑駁數(shù)大于100時(shí),這種辦法更客觀、可重復(fù)性高且節(jié)省時(shí)間。 因?yàn)槭菃渭?xì)胞水平檢查,ELISPOT比ELISA更活絡(luò),能從20萬(wàn)-30萬(wàn)細(xì)胞中檢出1個(gè)排泄該蛋白的細(xì)胞。 捕獲抗體具有高親和力、高特異性、低內(nèi)毒素的單抗,進(jìn)口ELISA試劑盒在研討者以刺激劑激活細(xì)胞時(shí),不會(huì)影響活化細(xì)胞排泄細(xì)胞因子。
*甲素 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 Triptolide 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
*乙素 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 Tripdiolide 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
*紅素 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 Celastrol 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
*內(nèi)酯甲 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 wilforlide A 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
木犀草素 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 Luteolin 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
木犀草苷 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 英文名稱 Cynaroside 含量: HPLC≥98% 規(guī)格: 20mg/支
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