培養(yǎng)基神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)方法
神經(jīng)細(xì)胞(神經(jīng)元〕不易培養(yǎng)基,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經(jīng)生長(zhǎng)因子和膠質(zhì)細(xì)胞因子時(shí),可出現(xiàn)一定程度的分化,長(zhǎng)出突起等現(xiàn)象,但很難使之增值。而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織中比較容易培養(yǎng)的成分。
人、鼠等腦組織即可用于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)基不僅能獲得生長(zhǎng)的膠質(zhì)細(xì)胞,也可形成能傳代的二倍體細(xì)胞系。一般說(shuō)來(lái),膠質(zhì)細(xì)胞在培養(yǎng)中生長(zhǎng)不穩(wěn)定,不易自發(fā)轉(zhuǎn)化,但對(duì)外界因素仍保持很好的敏感性,可用ROUS病毒和SV4等誘發(fā)轉(zhuǎn)化。
用于大腸桿菌的熒光檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Columbia- MUG Medium 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 250
用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 2216E Agar 2216E瓊脂 250
用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮鈉瓊脂) 250
用于培養(yǎng)擬桿菌 BDS Medium BDS培養(yǎng)基 250
用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn) Dextrose Agar 葡萄糖瓊脂 250
用于細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn) Andrade’s Carbohydrate Broth Andrade氏糖類肉湯 250
用于細(xì)菌枸椽酸鹽試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Korser Citrate Sodium Broth Korser氏枸椽酸鹽肉湯 100
用于大腸菌群的確診試驗(yàn)(APHA) Endo Agar Endo 培養(yǎng)基 250
用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)(SN/T1059.2) Buffered MUG Agar 緩沖MUG瓊脂 100
用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌群數(shù)(SN/T1059.2) LMG Agar 乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 250
用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測(cè)和計(jì)數(shù)(GB/T) Aliz-gal Agar 茜素-β-半乳糖苷瓊脂 250
用于大腸菌群的鑒定(NMKL) 培養(yǎng)基Tergitol-7 Agar Tergitol-7 瓊脂 250
添加于HB0127中 TTC Solution(0.125%) TTC 溶液(0.125%) 2ml*10
標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌計(jì)數(shù)、含糖(MERCK方法) Standard I Nutrient Agar 標(biāo)準(zhǔn)I號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250
細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(MERCK方法) Standard II Nutrient Agar 標(biāo)準(zhǔn)II號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250
用于檢測(cè)水中的大腸菌群(US-EPA標(biāo)準(zhǔn)) A1 Medium A1 培養(yǎng)基 250
用于濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)(NEOGEN方法) Tryptic Soy Fast Green Agar 胰胨大豆胨固綠瓊脂 250
用于濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Merck方法) m-Endo Agar,LES LES Endo 瓊脂 250g
用于奶制品中濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Acumedia方法) m-TGE Broth m-TGE 肉湯 250
培養(yǎng)方法如下:
1、從手術(shù)室無(wú)菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中,此時(shí)腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復(fù)二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過(guò)紗網(wǎng)成紗布過(guò)濾,計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。
5、接入培養(yǎng)基瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。
該細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境過(guò)程較長(zhǎng),培養(yǎng)基接種后貼壁較慢。貼壁后短期內(nèi)也可能不見(jiàn)細(xì)胞分裂現(xiàn)象,然而一旦生長(zhǎng)后即能迅速進(jìn)入旺盛的增殖狀態(tài)。細(xì)胞傳代可以0.25%*消化處理。