激情综合啪啪6月丁香,久久久久国产精品91福利,99精品日韩欧美在线观看,91成人午夜福利在线观看国产

上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第2年

13585831301

ELISA試劑盒
ATCC細(xì)胞
細(xì)胞
蛋白
生化試劑
標(biāo)準(zhǔn)品
擔(dān)體
中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
IBL試劑盒
*原時(shí)間試劑
血清
肉類及相關(guān)產(chǎn)品 實(shí)驗(yàn)室耗材系列 細(xì)胞系列 抗體純化試劑 單抗、多抗研制用材料 細(xì)胞培養(yǎng)用材料和試劑 免疫分析相關(guān)試劑 免疫分析科研試劑盒 抗體純化試劑盒 抗血清系列 動(dòng)物血漿系列 熱滅活血清系列 碳吸附過濾血清系列 培養(yǎng)細(xì)菌專用血清系列 動(dòng)物血清系列(pet瓶) HRP標(biāo)記抗原 天然純化抗原 動(dòng)物Ig類抗原 基因重組抗原 膠體金標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化 ) HRP標(biāo)記二抗(抗原親和純化) HRP標(biāo)記一抗(多抗為抗原親和純化,單抗為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體二抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 多克隆抗體一抗/PcAb(未標(biāo)注的為G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體二抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 單克隆抗體一抗/McAb(G或A蛋白親和純化) 裂解血 抗凝動(dòng)物血系列 脫纖維動(dòng)物血系列 無菌過濾動(dòng)物血清系列 輻照滅菌動(dòng)物血清系列 無菌采制動(dòng)物血清系列
科研抗體
PCR試劑盒
科研細(xì)胞
細(xì)胞生物學(xué)試劑

細(xì)胞培養(yǎng)基在水溶液提取需要注意的主要影響因素

時(shí)間:2014/7/25閱讀:908
分享:
  細(xì)胞培養(yǎng)基在水溶液提取需要注意的主要影響因素
  
  細(xì)胞培養(yǎng)基的提取一般以水溶液為主。稀鹽溶液和緩沖液對(duì)培養(yǎng)基的穩(wěn)定性好,溶解度大,是提取培養(yǎng)基和酶zui常用的溶劑。用水溶液提取生物大分子應(yīng)注意的幾個(gè)主要影響因素是:
  
  1)鹽濃度(即離子強(qiáng)度):離子強(qiáng)度對(duì)生物大分子的溶解度有極大的影響,有些物質(zhì),如DNA-蛋白復(fù)合物,在高離子強(qiáng)度下溶解度增加,而另一些物質(zhì),如RNA-蛋白復(fù)合物,在低離子強(qiáng)度下溶解度增加,在高離子強(qiáng)度下溶解度減小。絕大多數(shù)培養(yǎng)基和酶,在低離子強(qiáng)度的溶液中都有較大的溶解度,如在純水中加入少量中性鹽,培養(yǎng)基的溶解度比在純水時(shí)大大增加,稱為"鹽溶"現(xiàn)象。但中性鹽的濃度增加至一定時(shí),培養(yǎng)基的溶解度又逐漸下降,直至沉淀析出,稱為"鹽析"現(xiàn)象。鹽溶現(xiàn)象的產(chǎn)生主要是少量離子的活動(dòng),減少了偶極分子之間極性基團(tuán)的靜電吸引力,增加了溶質(zhì)和溶劑分子間相互作用力的結(jié)果。所以低鹽溶液常用于大多數(shù)生化物質(zhì)的提取。通常使用0.02mol/L~0.05mol/L緩沖液或0.09mol/L~0.15mol/LNaCl溶液提取培養(yǎng)基和酶。不同的培養(yǎng)基極性大小不同,為了提高提取效率,有時(shí)需要降低或提高溶劑的極性。向水溶液中加入蔗糖或甘油可使其極性降低,增加離子強(qiáng)度(如加入KCl、NaCl、NH4Cl或(NH4)2SO4)可以增加溶液的極性。
  
  2)pH值:培養(yǎng)基、酶與核酸的溶解度和穩(wěn)定性與pH值有關(guān)。過酸、過堿均應(yīng)盡量避免,一般控制在pH=6~8范圍內(nèi),提取溶劑的pH應(yīng)在培養(yǎng)基和酶的穩(wěn)定范圍內(nèi),通常選擇偏離等電點(diǎn)的兩側(cè)。堿性培養(yǎng)基選在偏酸一側(cè),酸性培養(yǎng)基選在偏堿的一側(cè),以增加培養(yǎng)基的溶解度,提高提取效果。例如*為堿性培養(yǎng)基,常用稀酸提取,而肌肉甘油醛-3-磷酸脫氫酶屬酸性培養(yǎng)基,則常用稀堿來提取。
  
  3)溫度:為防止變性和降解,制備具有活性的培養(yǎng)基和酶,提取時(shí)一般在0℃~5℃的低溫操作。但少數(shù)對(duì)溫度耐受力強(qiáng)的培養(yǎng)基和酶,可提高溫度使雜蛋白變性,有利于提取和下一步的純化。
  
  4)防止蛋白酶或核酸酶的降解作用:在提取培養(yǎng)基、酶和核酸時(shí),常常受自身存在的蛋白酶或核酸酶的降解作用而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。為防止這一現(xiàn)象的發(fā)生,常常采用加入抑制劑或調(diào)節(jié)提取液的pH、離子強(qiáng)度或極性等方法使這些水解酶失去活性,防止它們對(duì)欲提純的培養(yǎng)基、酶及核酸的降解作用。例如在提取DNA時(shí)加入EDTA絡(luò)合DNAase活化所必須的Mg++。
  
  5)攪拌與氧化:攪拌能促使被提取物的溶解,一般采用溫和攪拌為宜,速度太快容易產(chǎn)生大量泡沫,增大了與空氣的接觸面,會(huì)引起酶等物質(zhì)的變性失活。因?yàn)橐话闩囵B(yǎng)基都含有相當(dāng)數(shù)量的巰基,有些巰基常常是活性部位的必需基團(tuán),若提取液中有氧化劑或與空氣中的氧氣接觸過多都會(huì)使巰基氧化為分子內(nèi)或分子間的二硫鍵,導(dǎo)致酶活性的喪失。在提取液中加入少量巰基乙醇或半*以防止巰基氧化。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言