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肉毒梭菌E/F型毒素基因PCR檢測試劑盒

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品       牌

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更新時間:2022-03-14 10:22:39瀏覽次數(shù):213次

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產(chǎn)品簡介

肉毒梭菌E/F型毒素基因PCR檢測試劑盒【產(chǎn)品簡介】本試劑盒基于PCR技術,并適用于食品中肉毒梭菌E/F型毒素基因的檢測

詳細介紹

肉毒梭菌E/F型毒素基因PCR檢測試劑盒

【產(chǎn)品簡介】

本試劑盒基于PCR技術,并適用于食品中肉毒梭菌E/F型毒素基因的檢測。

【檢測原理】

利用2對特異性引物和PCR反應所需其他試劑,如反應緩沖液、dNTPs以及Taq DNA聚合酶等,加入待檢DNA模板樣品,即可進行PCR擴增反應。經(jīng)比對擴增產(chǎn)物目標條帶即可判定E/F型肉毒梭菌毒素基因。

【產(chǎn)品特點】

1. 快速簡便:將酶、引物等反應組分混勻后進行干粉化處理,增加試劑穩(wěn)定性,使用時減少溶液配制步驟,更為便捷,整個檢測反應可在3 h內(nèi)完成;

2. 特異性高:按照GB 4789.12?2016《食品微生物學檢驗肉毒梭菌及肉毒毒素檢驗》提供的目標基因引物,保證擴增反應的高度特異性;

3. 判讀簡單:擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳和紫外儀觀察目標條帶即可判別,直觀方便。

【產(chǎn)品組分】

編號

組分名稱

規(guī)格×數(shù)量

--

凍干試劑(bont E/F)

8管×3排

--

復溶液

1 mL×1管

Y07

陽性對照

1管(凍干型)

--

陰性對照

1管(凍干型)

--

裂解液

1 mL×1管

--

超純水

1 mL×1管

--

6×Loading buffer

240 μL×1管

 

說明書

1份

【儲存條件與保質(zhì)期】

2~8℃條件下儲存,有效期為12個月。

【所需其他材料和適用儀器】

1. PCR儀器、高速離心機、電泳儀、水平電泳槽、紫外儀、移液器、移液槍頭及離心管等;

2. 瓊脂糖、溴化乙錠(EB)或其他核酸染料。

【使用指南】

1. 樣品前處理

1) 參照GB 4789.12?2016,挑取可疑菌落或待鑒定菌株接種TPGY,35℃±1℃厭氧培養(yǎng)24 h。吸取TPGY培養(yǎng)液1 mL至無菌離心管中,12000 r/min離心2 min,棄上清,加入30 μL裂解液,充分懸浮,轉移至0.2 mL無菌離心管中,輕彈管壁消除氣泡,99℃加熱10 min;

2) 12000 r/min離心15 min,上清即為粗提的DNA,可轉移至0.2 mL無菌離心管中,在-20℃下可長期保存。

2. 加樣、反應

1) 使用時,分別加入80 μL超純水至陽性對照和陰性對照管中,充分溶解,-20℃存儲待用;

2) 取出干粉試劑,按照需求分別剪取n個檢測試劑管(n=待檢測樣品數(shù)+1管陽性對照+1管陰性對照),每管加入18 μL復溶液,充分溶解后待用;

3) 向上述已加入復溶液的n個反應管中分別加入待測樣品核酸、陰性對照、陽性對照各2 μL,緊蓋后置于PCR儀中按設定的反應程序進行擴增反應;

4) PCR反應程序如下:

3. 結果判讀

反應后每管中加入4 μL6×Loading buffer,混勻,并取8 μL經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳,在紫外儀下觀察,陰性對照無條帶擴增,陽性對照中出現(xiàn)目標條帶(參照圖1),PCR試驗結果成立。根據(jù)每個樣品對應的反應產(chǎn)生的目標條帶,即可判斷肉毒梭菌毒素基因類型。若陰陽性對照管反應結果不符,則本次檢測結果無效,應重新檢測或與產(chǎn)品技術支持聯(lián)系。

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