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高品質(zhì)96T 人游離三碘甲狀腺原氨酸（Free-T3）ELISA試劑盒

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廈門(mén)慧嘉生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

廈門(mén)慧嘉生物*經(jīng)營(yíng)人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒。誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，價(jià)格實(shí)惠，服務(wù)周到，質(zhì)量有保證。歡迎廣告老師來(lái)詢！: :

詳細(xì)介紹

廈門(mén)慧嘉生物*經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒及Santa/Abcam抗體、Prospec細(xì)胞因子、Sigma/Amresco/Qiagen、Axygen耗材等生物試劑產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)為大，誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)，為客戶提供“zui高質(zhì)量的產(chǎn)品”和“的服務(wù)”。歡迎廣大老師來(lái)詢！: : 1048735792 或登陸http://www.biohj.com/download.aspx（向客服人員索取原版說(shuō)明書(shū)）

產(chǎn)品名稱：人游離三碘甲狀腺原氨酸（Free-T3）ELISA Kit

產(chǎn)品英文： Human Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格： 96T

產(chǎn)品類別：人激素類ELISA試劑盒[Human hormone ELISA Kit]

人游離三碘甲狀腺原氨酸（Free-T3）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑盒僅供研究使用

特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的Free-T3，且與其他相關(guān)蛋白基本無(wú)交叉反應(yīng)。

有效期：6個(gè)月（2-8℃避光保存）

預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定人血清，血漿及其它相關(guān)生物液體中Free-T3含量。

說(shuō)明

1. 濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

2. 剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

實(shí)驗(yàn)原理

用純化的Free-T3抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的Free-T3抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Free-T3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（值），計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）： 5瓶（凍干品）。

標(biāo)準(zhǔn)品為凍干品，使用前分別用0.5ml蒸餾水溶解，溶解后濃度分別為：

Standard 1 Standard 2 Standard 3 Standard 4 Standard 5

8μIU/ml 16μIU/ml 32μIU/ml 80μIU/ml 140μIU/ml

3. 酶結(jié)合物（HRP-conjugated antibody）： 1×6ml/瓶。

4. 顯色劑A（Substrate A）： 1×7ml/瓶。

5. 顯色劑B（Substrate B）： 1×7ml/瓶。

6. 濃洗滌液（Wash Buffer）： 1×15ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋20倍。

7. 終止液（Stop Solution）： 1×7ml/瓶

需要而未提供的試劑和器材

1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等

標(biāo)本的采集及保存

1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注：以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過(guò)1個(gè)月，-80℃不應(yīng)超過(guò)2個(gè)月；標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

操作步驟

1. 將各種試劑至室溫〔18-25℃〕平衡半小時(shí)，取濃縮洗滌液，根據(jù)當(dāng)批檢測(cè)數(shù)量，用蒸餾水上1：20稀釋，混勻后備用。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品Standard 1- Standard 5，*次使用前先用0.5ml蒸餾水溶解，放置混勻后使用。

3. 將酶標(biāo)板取出，設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔、不加任何液體；每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)依次各設(shè)兩孔，每孔加入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品50ul；其余每個(gè)檢測(cè)孔直接加待測(cè)標(biāo)本50ul。

4. 每孔加入酶結(jié)合物50ul（空白對(duì)照孔除外），充分混勻，貼上不干膠封片，置37℃溫育2小時(shí)。

5. 手工洗板，棄去孔內(nèi)液體。洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復(fù)三次后拍干；洗板機(jī)洗板，選擇洗滌三次程序，洗板后拍干。

6. 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。

7. 用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長(zhǎng)450nm，先用空白孔調(diào)零點(diǎn)，然后測(cè)定各孔OD值。

數(shù)據(jù)處理

1. 手工作圖：用雙對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫軸，以對(duì)應(yīng)的0D值為縱軸，畫(huà)出平滑曲線或直線，在曲線上按照待測(cè)血清OD值找到對(duì)應(yīng)的濃度值。

2. 計(jì)算機(jī)：使用線性擬合功能，應(yīng)將標(biāo)準(zhǔn)品S1-S5的濃度取對(duì)數(shù)（Log（濃度））作為X，將對(duì)應(yīng)的OD值減去空白對(duì)照孔OD值后取對(duì)數(shù)（Log（OD值-NSB））作為Y，進(jìn)行線性擬合。再?gòu)臄M合線上計(jì)算出待測(cè)血清濃度。

3. 高濃度血清的測(cè)值校正：待測(cè)血清測(cè)值高于160μIU/ml時(shí)，應(yīng)進(jìn)行校正：設(shè)測(cè)出濃度為AμIU/ml，則實(shí)際濃度B＝Log（A/100）+1×160 。

注意事項(xiàng)

1. 從冷藏環(huán)境中取出的試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及所需預(yù)包被板條應(yīng)置室溫

（18-25℃）平衡30分鐘后方可使用，余者應(yīng)及時(shí)封好口，放回2-8℃中避光保存，以備后用。

2. 使用前試劑應(yīng)搖勻。

3. 結(jié)果判斷須在反應(yīng)終止后10分鐘內(nèi)完成。

4. 不同批號(hào)的試劑不可混用。

5. 加樣時(shí)應(yīng)注意避免所用各試劑及樣品之間的交又污染。

6. 操作時(shí)，試劑盒內(nèi)每種試劑各使用一個(gè)吸頭，每一種標(biāo)準(zhǔn)品使用一個(gè)吸頭，每一個(gè)樣品各使用一個(gè)吸頭，吸頭一次性使用。

關(guān)鍵詞：酶標(biāo)儀高速離心機(jī) 電熱恒溫培養(yǎng)箱移液器洗板機(jī)

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