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Elisa實(shí)驗(yàn)類型選擇

時(shí)間：2016/8/29閱讀：1159

Elisa實(shí)驗(yàn)類型選擇
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術(shù)從1970年代發(fā)展至今已近半個(gè)世紀(jì)，是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室zui基本的免疫檢測(cè)技術(shù)，被廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。那么面對(duì)市面上數(shù)以千計(jì)的試劑盒，數(shù)百家供應(yīng)商，對(duì)于剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的新手或者準(zhǔn)備開(kāi)展ELISA實(shí)驗(yàn)的人員，又該如何選擇且質(zhì)量又可靠的ELISA試劑盒呢？
1. 首先選定ELISA類型
ELISA技術(shù)可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。牛ELISA檢測(cè)試劑盒 ELISA方法中有三個(gè)必要的試劑：(1) 固相的抗原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；(2) 酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；(3) 酶反應(yīng)的底物。
一般可將ELISA分為以下幾種類型，實(shí)驗(yàn)君首先需要根據(jù)自己的待檢物來(lái)確定試劑盒類型。
1) 雙抗體夾心法：針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測(cè)抗體。適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子，不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原。同理，也有雙抗原夾心法測(cè)抗體。
2) 直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一抗，即可測(cè)定抗原總量。此法操作手續(xù)簡(jiǎn)短，因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
3) 間接法：間接法是檢測(cè)抗體常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體（抗抗體）來(lái)檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
4) 競(jìng)爭(zhēng)法：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時(shí)，可用此法檢測(cè)特異性抗體。

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Elisa實(shí)驗(yàn)類型選擇

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