人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶_Neutrophil Elastase ELISA試劑盒

QY-RM01004    人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒    human Neutrophil Elastase ELISA Kit

人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶_Neutrophil Elastase ELISA試劑盒組織勻漿液的制備

①、手工勻漿：取組織塊（0.2g～0.5g）在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放

入勻漿管中，按重量(g):體積(ml)=1:4 的比例加入 4 倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水

浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊，將玻璃勻漿管置于冰水浴條件，手動(dòng)勻漿，30 秒/

次，間隔 30秒，重復(fù) 6～8 次，制成20%的勻漿液。

②、機(jī)器勻漿：取組織塊（0.2g～0.5g）在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放

入勻漿管中，按重量(g):體積(ml)=1:4 的比例加入 4 倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水

浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊，機(jī)械式勻漿機(jī)（組織搗碎機(jī)或內(nèi)切式勻漿機(jī)） ，

10000～15000 轉(zhuǎn)/分，冰水浴條件下，15 秒/次，間隙 30 秒，連續(xù) 3～5 次，制成 20%的勻漿液。

③、液氮研磨：取組織塊（0.2g～0.5g）在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放

入研缽中，用眼科小剪盡快剪碎組織塊，加入液氮研磨至粉末狀（研磨要迅速），加入勻漿

介質(zhì)，充分抽提，制備成 20%的勻漿液。 鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片，顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎，若沒(méi)有則可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。

勻漿上清液的制備：將制備好的 20%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī) 3500 轉(zhuǎn)/分左右,離

心 10～15 分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定.

人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶_Neutrophil Elastase ELISA試劑盒樣本保存:

植物組織樣本暫時(shí)不測(cè)定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如*凍融，-20℃以下

可保存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月。

制備好的勻漿液建議不要凍存,當(dāng)天進(jìn)行測(cè)定,如放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)相關(guān)酶活會(huì)有所下降,部

分指標(biāo) 4℃可存放 3～5 天(如 SOD 要存放 2～3 天,MDA 可存放 3～5,總蛋白測(cè)定可存 5～7 天等)

如指標(biāo)太多可將勻漿上清液分裝保存，每次測(cè)定時(shí)每個(gè)樣本取出一管用于測(cè)定，切勿反復(fù)凍

融。 [注]：磷酸鹽緩沖液作為勻漿介質(zhì)，不可用于無(wú)機(jī)磷、ATP酶、ATP 含量、羥自由基等相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目；

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