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齊一生物科技(上海)有限公司

大鼠酸性鐵蛋白(AIF)酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒

時(shí)間:2017-6-13閱讀:217
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產(chǎn)品名稱:大鼠酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒

貨號:QY-R2011

英文名稱:Rat  apoptosis inducing factor ELISA Kit

類別:酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒

規(guī)格:96T/48T

包裝:盒

檢測原理:采用雙抗夾心法

保質(zhì)期:六個(gè)月

產(chǎn)品保存條件:2-8°C

應(yīng)用范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)使用

樣品形式:血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清//其它生物液體(具體情況請咨詢)

檢測試劑盒操作步驟

1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9mmol/L,6 mmol/L,3 mmol/L,1.5mmol/L, 0.75 mmol/L)。

2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4、配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7、溫育:操作同3。

8、洗滌:操作同5。

9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 

10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

注意事項(xiàng):

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

底物請避光保存。

嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

本試劑不同批號組分不得混用。

如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。  

(AIF)檢測范圍、 OD值:

具體請咨詢在線客服,或者來電索要詳細(xì)說明書!

 

齊一生物科技(上海)有限公司主要經(jīng)營進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,自產(chǎn)品牌QIYBO試劑盒,種類齊全,價(jià)格實(shí)惠,凡購買我公司產(chǎn)品的新老客戶,即可享免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測人源,小鼠,大鼠,豬,狗,猴,兔,羊,雞,牛,鴨子,魚,植物,昆蟲等各種種屬樣本。全程提供。如需其他Elisa試劑盒說明書及報(bào)價(jià),可我公司! 

齊一生科技(上海)有限公司 感謝您的查閱與咨詢!期待與您的真誠合作!

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