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上海研生生化試劑有限公司

免疫組化技術(shù)過程

時間:2015-8-12閱讀:375
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1. 固定

用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。 有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。

(1)BouinS固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標本的長期保存。

(2)PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。

2. 組織脫水、透明

時間不能太長,否則在切片時容易碎片,切不完整。

3. 切片時展片

有些組織在切片后難以在水中展開,這時可適當?shù)卦谒屑尤霂椎我掖肌?/p>

4. 烤片

60℃ 30分鐘或37℃ 過夜,溫度太高或時間太長,抗原容易丟失。

5. 蠟塊及切片的保存

在4℃保存

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