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豐壽(上海)生物科技有限公司

ELISAS試劑盒的異性抗體

時(shí)間:2016-1-18閱讀:362
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    這次研究主要能夠成功,得益于將試驗(yàn)老鼠人化,老鼠的基因雖然后很多和人是相似的,但是還是有不同。為了盡量降低人和老鼠之間的差異,這次使用了人ELISA試劑盒和小鼠ELISA試劑盒,用ELISAS試劑盒將人體器官移植到老鼠體內(nèi),觀察結(jié)果。將老鼠人話后,在對(duì)老師進(jìn)行各種免疫分子的試驗(yàn),類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療藥物和一種腫瘤誘導(dǎo)免疫耐受中起重要作用的蛋白在這次的試驗(yàn)中起到了很大的作用。ELISA試劑盒根據(jù)抗原抗體結(jié)合的不同個(gè)可以分為直接法和間接法。

    其中直接法又稱為一步法。下面先來(lái)介紹直接法,直接法又稱為雙抗體夾心法,此法一般使用于檢測(cè)大分子抗原(如蛋白質(zhì)類抗原),制藥獲得受檢抗原,就可以用雙抗體夾心法來(lái)檢測(cè)抗原。抗體的抗原一般來(lái)源于血清,所以酶標(biāo)記用的抗體是取自不同物種的動(dòng)物。ELISAS試劑盒雙抗體夾心法具有很高的特異性,可以將受檢的標(biāo)本盒酶標(biāo)記的抗體一起保溫反應(yīng),然后進(jìn)行檢測(cè)。不過(guò)要注意一點(diǎn)點(diǎn)餓是,類風(fēng)濕因子,由于自身含有抗體,能和很多動(dòng)物的抗原相結(jié)合,所以在做雙抗體夾心法時(shí),要先排除類風(fēng)濕因子的干擾。

使用ELISA試劑盒的步驟:
1.在使用之前要將試劑充分的混合均勻,但是要注意在搖晃的時(shí)候不要產(chǎn)生過(guò)多的泡沫,從而造成有太多的空氣進(jìn)入試劑中,產(chǎn)生測(cè)試誤差。
2.根據(jù)要檢測(cè)樣品的數(shù)量來(lái)確定的板條數(shù)。每個(gè)比對(duì)的樣品和空白孔是做復(fù)孔,ELISAS試劑盒而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定,不過(guò)能用復(fù)孔的還是用復(fù)孔。將標(biāo)本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應(yīng)孔中。
3.在反應(yīng)孔中在加入50微升的待測(cè)樣品,然后馬上加入50微升的*標(biāo)記抗體,蓋上模板,輕輕搖晃使其混合均勻后,在37攝氏度的恒溫下等待1小時(shí)。
4.將孔內(nèi)液體甩去,加滿洗滌液,震蕩約30秒后,在甩去洗滌的液體,用紙將水吸干。這樣子重復(fù)三次。再在沒(méi)空加入80微升的親和鏈酶素-HRP,同上混合均勻后,在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等待半小時(shí)。

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