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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>今日詳解:捕獲包被法檢測抗體
捕獲包被法(亦稱反向間接法)ELISA,首要用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。以目前常用的IgM測定為例,因血清中針對(duì)某種抗原的特異性IgM和IgG同時(shí)存在,則后者可煩擾IgM的測定。類風(fēng)濕因子(RF)相同能煩擾捕獲包被法測定IgM抗體,導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。因此中和IgG的間接法近來頗受喜歡,用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。
捕獲法測抗體的簡明操作過程:
1)特異性捕獲抗體的包被,先把能特異性結(jié)合待測抗原的抗體固定于固相載體表面;
2)參與待測樣品,經(jīng)過固定在載體表面的針對(duì)該抗原的抗體固定于載體表面;
3)參與特異性抗原以及針對(duì)該特異性抗原的酶標(biāo)抗體;
4)參與酶促反應(yīng)底物,發(fā)作顯色反應(yīng),顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
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