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血清,指血液凝結(jié)后,在血漿中除掉纖維蛋白原分離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。其主要效果是供給根本營養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種生長因子、供給結(jié)合蛋白、供給促觸摸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培育中的細(xì)胞起到某些保護(hù)效果。
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):
(1)切勿將血清在37℃放置太久,不然血清會(huì)變得污濁,一同血清中的有效成分會(huì)破壞而影響血清質(zhì)量。
(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*凍結(jié)的血清.加熱過程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻.此熱處理的意圖是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉積物明顯增多,并且還會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參加反響有:細(xì)胞毒效果, 滑潤肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板開釋組胺, 增強(qiáng)吞噬效果, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)作化學(xué)趨化和活化。
(3)瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉積的發(fā)作.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié),這樣因溫度改變太大,簡單造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉積。
(4)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培育液內(nèi)一同過濾,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的沉積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結(jié)后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清自身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過熱處理過的血清,沉積物的構(gòu)成會(huì)明顯增多.有些沉積物在顯微鏡下調(diào)查象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長,但如果置疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。
(6)需要長時(shí)間保存的血清必須貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月.因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留必定體積空間,不然易發(fā)作污染或玻璃瓶凍裂。
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