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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA實驗中,成果取決于細節(jié)

時間:2018-7-10閱讀:232
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試驗科研者們往往對成果zui為重視,而因而疏忽了細節(jié)問題,但成果取決于細節(jié)!做試驗,上海酶聯(lián)生物教您掌握ELISA試劑盒細節(jié)(供參閱,了解更多可在本公司中留言)。
◆依據(jù)采用的載體分為:
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.硝酸纖維膜為載體。
ELISA是將酶催化的擴大效果與特異性抗原抗體反響結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶符號抗原或抗體今后,既不影響抗原抗體反響的特異性,也不改動酶自身的活性。由于ELISA試劑盒價格低廉且準確性搞、反響時間短等優(yōu)點,所以合適大批量的檢測,一般常常用于食品安全檢測方面。
◆ELISA需求遵從的幾個細節(jié)關(guān)鍵:
1.抗原或抗體能吸附于固相載體外表,并堅持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可依據(jù)加入底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可依據(jù)已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規(guī)范曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
◆注意事項:
1、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)作假陽性反響。保存過久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍住標本溶解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上激烈震蕩。
3、污濁或有沉積的標本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測。
4、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作屢次檢測,宜少數(shù)分裝冰存。

 

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