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當(dāng)前位置:上海研域儀器設(shè)備有限公司>>公司動態(tài)>>ELISA試劑盒對血清樣本的處理
ELISA試劑盒在處理血清時應(yīng)注意血清的三大特點:
1. 瓶裝(500ml) 血清解凍步驟(逐步解凍法): -20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50 ml 無菌離心管可分裝40~45 ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。ELISA試劑盒勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。
2.heat-inactivation 是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍之血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement) 去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為會造成沈淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。補體參與之反應(yīng)有:cytolytic activities, contraction of smooth muscle, release of histamine from mast cells and plaets, enhanced phagocytosis, chemotaxis and activation of lymphocytic and macrophage cell type。
3. 血清必須貯存于–20 ~ -70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一 瓶,可將40~45 ml分裝于無菌50 ml 離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10 %,ELISA試劑盒 必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。
ELISA試劑盒實驗注意事項:
一. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
二. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
三. 底物請避光保存。
四. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
五. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
六. ELISA試劑盒不同批號組分不得混用。
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