雞C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒的詳細(xì)資料:
ELISA試劑盒規(guī)格:
(1)96T可用做84個標(biāo)本,12個標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)48T可用做42個標(biāo)本,6個標(biāo)準(zhǔn)曲線;
ELISA試劑盒組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應(yīng)終止液。
保存條件:2-8℃低溫保存;
保質(zhì)期:六個月;
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
雞C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒試驗所需自備物品:
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3. 37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
檢測前準(zhǔn)備工作:
1. 請?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中,靜置10分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
4. *化抗體工作液:實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。
5. 酶結(jié)合物工作液:實驗前計算當(dāng)次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應(yīng)多配制 100-200μl。使用前15分鐘,以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。
雞C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa試劑盒本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。