雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒的詳細(xì)資料：

ELISA試劑盒規(guī)格：

（1）96T可用做84個(gè)標(biāo)本，12個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線；

（2）48T可用做42個(gè)標(biāo)本，6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線；

ELISA試劑盒組成：

（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

（3）酶的底物；

（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；

（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

（6）洗滌液；

（7）酶反應(yīng)終止液。

保存條件：2-8℃低溫保存；

保質(zhì)期：六個(gè)月；

用途：科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。

雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒試驗(yàn)所需自備物品:

1.  酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)

2.  高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl

3.  37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水

4.  吸水紙

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:

1. 請(qǐng)?zhí)崆?/span>20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正?，F(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

3.  標(biāo)準(zhǔn)品: 加入標(biāo)準(zhǔn)品&標(biāo)本稀釋液1.0ml至凍干標(biāo)準(zhǔn)品中，靜置10分鐘，待其充分溶解后，輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據(jù)需要進(jìn)行倍比稀釋(注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

4. *化抗體工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

5. 酶結(jié)合物工作液：實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μl/孔計(jì))，實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制  100-200μl。使用前15分鐘，以*化抗體稀釋液稀釋濃縮*化抗體(1:100)成工作濃度。當(dāng)日使用。

雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa試劑盒本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。