異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒_乙醛酸循環(huán)系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
異檸檬酸裂解酶(ICL)測(cè)試盒_乙醛酸循環(huán)系列
測(cè)定意義：
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過(guò)程中，通過(guò)乙醛酸循環(huán)及其他過(guò)程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL 是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。
測(cè)定原理：
ICL 催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和 NADH 在 LDH 的作用下生成乙醇和NAD，NADH 在 340nm 下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè) 340nm 吸光度的減小速率可間接反應(yīng) ICL 活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制：
提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 15mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 15mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×3 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水，充分混勻待用；用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑四：粉劑×3 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水，充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑五：液體 800μL×2 支，4℃保存；臨用前每支加入 560μL 蒸餾水，充分混勻待用；用不完的試劑仍 4℃保存；
試劑六：粉劑×3 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 5mL 蒸餾水，充分混勻待用。用不完的試劑-20℃保存；
樣本的前處理：
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
環(huán)保在線(xiàn)