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人ELISA試劑盒操作的應(yīng)用范圍,你知道嗎?

時(shí)間:2014-12-3閱讀:1799
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   人ELISA試劑盒的主要組成成份是什么呢?根據(jù)ELISA試劑盒的應(yīng)用范圍,可將ELISA試劑盒分為拿幾種呢?

完整的ELISA試劑盒主要的組成成份如下:

(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

(2)C的抗原或抗體(結(jié)合物);

(3)酶的底物;

(4)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);

(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;

(6)洗滌液,在板式人ELISA試劑盒中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。

操作過程的控制:

⑴ 嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。

⑵ 加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。

(5)合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。

(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。

(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。

(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。

(9)應(yīng)保證C清潔,整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。人ELISA試劑盒以上的措施可以使“花板”降至zui低限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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