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當(dāng)前位置:齊一生物科技(上海)有限公司>>技術(shù)文章>>直鏈含量測定、支鏈含量測定、總淀粉含量測定三合一試劑盒
淀粉是一種天然高分子化合物,存在于植物的根、莖或種子中,淀粉組成可以分為兩類,直鏈淀粉與支鏈淀粉。自然淀粉中直鏈,支鏈淀粉之比一般約為15-28%比72-85%,視植物種類、品種、生長時期的不同而異。
本試劑盒利用伴刀豆球蛋白 A 只與支鏈淀粉結(jié)合而不與直鏈淀粉結(jié)合的特性,使其分離,再用僅水解淀粉的酶復(fù)合物使淀粉水解為葡萄糖,通過檢測葡萄糖含量得到直鏈含量、 支鏈含量和總淀粉含量。
樣本制備:
取 1-5g 樣本烘干(50℃)至恒重,磨碎并過篩(如 0.5mm 篩)得到待檢均勻粉末樣本,再取 10mg 粉末樣本至 10mLEP 管中,加入 0.5mL 的 DMSO,沸水 1min,高速渦旋振蕩后再沸水浴 15min(務(wù)必間歇振蕩,使樣本全部分散),樣本務(wù)必冷卻后再加 1mL 無水乙醇立即高速渦旋振蕩,避免聚合(建議逐個樣本操作),再加 2mL 無水乙醇高速渦旋振蕩(使樣本全部分散),4000rpm 離心 5min,棄上清留沉淀,干燥 10min 后,向沉淀中加 1mL 的 DMSO 混勻,沸水浴 15min(觀察:不能產(chǎn)生明顯的凝膠塊,否則重做)。待自然冷卻至室溫后再用試劑一稀釋液定容到 10mL 即為待檢測液(直鏈淀粉測定務(wù)必在 2 個小時內(nèi)完成)。
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