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齊一生物科技(上海)有限公司
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吖啶橙染色試劑盒-齊一生物

時間:2019/12/12閱讀:347
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吖啶橙(AO)是一種選擇性熒光陽離子染料,它能透過細胞膜,活細胞與死細胞均能被其染色。吖啶橙常用于熒光顯微鏡和流式細胞儀技術(shù)中細胞生理學(xué)與細胞周期的分析,該細胞滲透型染色液可與其他很多染色液及方法聯(lián)合使用。

在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過完整細胞膜,將活細胞的細胞核染成均勻的綠色熒光;而凋亡細胞由于其染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片段,吖啶橙將細胞核染成黃綠色亮綠色熒光;死亡細胞呈橙色熒光,但熒光很弱甚至?xí)А?/span>

試劑盒組成

成分

100 次

200 次

組分 A:AO 染色液

0.5 mL

1 mL

組分 B:10×緩沖液

10 mL

20 mL

說明書

1

1

儲存條件

2-8°C 避光保存,有效期為 12 個月。

操作步驟

注意:以下操作適用于大多數(shù)細胞類型

1. 使用前請將小瓶離心。

2. 使用前將 10×緩沖液(組分 B)用雙蒸水稀釋成 緩沖液。

3. PBS 洗滌細胞兩次后,用適量的 緩沖液重懸細胞調(diào)整細胞濃度為 106 /mL。

注意:貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。 在某些必要情況下,可使用 TritonX-100 進行細胞通透。

4. 95 μL 細胞懸液,加入 5 μL AO 染色液,輕柔混勻。

5. 室溫避光孵育 1-5 分鐘。

注意:較好的染色濃度及培養(yǎng)時間,根據(jù)細胞的不同而不同。

6. 10 μL 混合液,滴加在一個干凈的載玻片上,并加蓋蓋玻片。

7. 在熒光顯微鏡下檢測 Ex / Em = 488 / 1515nm 處的細胞。

警告!

使用前,請仔細閱讀說明書,為了您的安全,請佩戴手套,護目鏡,或是其他保護措施。

本試劑盒僅用于研發(fā),不可藥用,家庭或其他。

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