細(xì)胞株名稱:人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
細(xì)胞編號(hào):HN0050
代號(hào):hFOB 1.19
【人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞】傳代操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
常見問(wèn)題及解決方案
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞*可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。
我公司保證細(xì)胞純度在90%以上;同時(shí)也需經(jīng)過(guò)微生物檢測(cè),《 》保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌。
購(gòu)買細(xì)胞時(shí)注意事項(xiàng):
1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
及相關(guān)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品:
HN0050 | hFOB 1.19 | |||
HN0051 | HMy2.CIR | 人B淋巴母細(xì)胞 | ||
HN0052 | QSG-7701 | 人肝細(xì)胞 | ||
HN0053 | SV-HUC-1 | 人膀胱上皮永生化細(xì)胞 | ||
HN0054 | THLE-3 | 人肝永生化細(xì)胞 | ||
HN0055 | WISH | 人羊膜細(xì)胞 | ||
HN0056 | WPMY-1 | 人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞 | ||
HN0057 | HK-2 | DMEM-F12 | 人腎小管上皮細(xì)胞 | |
HN0058 | L02 | DMEM 10%FBS | 人正常肝細(xì)胞 | 貼壁 |
HN0059 | hFOB1.19 | 人永生化成骨細(xì)胞 | ||
HC0001 | K562 | 1640 10% | 慢性髓原白血病 | 懸浮 |
HC0002 | H128* | DMEM 10% | 小細(xì)胞肺癌 | 懸浮,集聚 |
HC0003 | H69 | DMEM 10% | 小細(xì)胞肺癌 | 懸浮 |
HC0004 | HS77 | DMEM 10% | 小細(xì)胞肺癌 | 懸浮 |
HC0005 | A549 | 1640 10% | 肺腺癌 | 上皮樣 |
HC0006 | LTEP-A2 | 1640 10% | 肺腺癌 | 上皮樣 |
HC0007 | SPC-A1* | 1640 10% | 肺腺癌 | 上皮樣 |
HC0008 | D6 | 1640 10% | 肺腺癌 | 上皮樣 |
HC0009 | LAX | 1640 10% | 肺腺癌 | 皮樣 |
HC0010 | NCI-H460 | DMEM 10% | 大細(xì)胞肺癌 | 上皮樣 |
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