豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時候,被檢測靶目標中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判斷標本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒的優(yōu)勢:
全面——混合8種不同的常見抗原,對自身免疫性疾病進行全面篩查。
快速——檢測時間短(~2小時),確診時間更早。
準確——ELISA檢測方法,靈敏度高,特異性強,適用性好。
質(zhì)優(yōu)——*開發(fā),高品質(zhì)及高可靠性的分析性能。
價低——國內(nèi)自生產(chǎn),符合國內(nèi)實情,降低生產(chǎn)成本
小鼠60000SSA抗體ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測》———技術(shù)指導(dǎo)
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小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISAKit酵素免疫分析法 【48次/96次(T)】《代測》———技術(shù)指導(dǎo)
小鼠雄烯二酮(ASD)ELISAKit酵素免疫分析法【48次/96次(T)】《代測》———技術(shù)指導(dǎo)
標本/陰性對照比值
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒KIT在實驗條件(包括)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應(yīng)誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
洗滌板:可以說在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)。因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的,豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒KIT清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機除外),洗的不*或串了孔,對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。