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鴿子飛行能力基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）使用說明書   

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：鴿子飛行能力基因檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）  

【預(yù)期用途】

本試劑盒用于鴿子飛行能力基因定性檢測，可對鴿子的飛行能力進(jìn)行預(yù)測。  

【檢測原理】

根據(jù)鴿子飛行能力基因設(shè)計特異性引物和探針，利用熒光定量PCR技術(shù)，通過檢測熒光的釋放和強度，來檢測飛行能力基因。  

【試劑盒組成】

本產(chǎn)品由特異性引物探針、Taq酶以及反應(yīng)緩沖液組成。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存有效期為12個月；切忌反復(fù)凍融。

【樣本要求】

1、羽毛：采集胸部或腹部或腿部羽毛2根，切忌使用自然脫落的羽毛。  

2、全血：使用EDTA作為抗凝劑，切忌使用肝素抗凝。要求使用新鮮全血，或在2～8℃保存不超過7天，或在-20℃以下保存不超過一個月，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融。  

【檢驗方法】

1、樣本處理與核酸提取，具體操作參照相關(guān)操作說明書。

（1）0.2ml PCR管中，加入羽毛2-4根，加入Reagent A 20ul（注意淹沒樣本），99℃加熱20分鐘；  

（2）向上一步的Pcr管中加入Reagent B 100ul，5000rpm離心30秒-1分鐘，備用；  

2、儀器準(zhǔn)備將每臺儀器接通電源，檢查是否運轉(zhuǎn)正常。  

3、物品準(zhǔn)備：離心機、冰盒、移液器、吸頭；試劑準(zhǔn)備（未分裝規(guī)格使用）：將PCR反應(yīng)液解凍、混勻，瞬時離心后分裝14µL/管。

4、 PCR擴增條件（反應(yīng)體系為20μL）

5、熒光定量檢測  

結(jié)果判定  

【檢驗方法局限性】

本方法只適用于鴿子飛行能力基因檢測。  

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.  特異性：對特異性參考品進(jìn)行檢測，所有參考品檢測結(jié)果陰性。  

2.  準(zhǔn)確性：對檢測范圍內(nèi)的不同基因型的參考品進(jìn)行檢測，能檢出相應(yīng)基因型。  

3.  檢出限：應(yīng)不高于5ng/µL。  

4.  重復(fù)性：檢測范圍內(nèi)的不同基因型的重復(fù)性參考品，每個參考品進(jìn)行10次檢測，結(jié)果能準(zhǔn)確分型，且相應(yīng)檢測結(jié)果Ct值的變異系數(shù)（CV）應(yīng)≤5.0%。  

5.  有效期：試劑盒于-20避光保存，有效期為12個月。  

【注意事項】 實驗前請仔細(xì)閱讀說明書

1. 本試劑盒僅鴿子飛行能力基因體外檢測。有關(guān)實驗室管理規(guī)范嚴(yán)格按照行政主管部門頒布的有關(guān)基因擴增檢測實驗室的管理規(guī)定執(zhí)行。  

2. 試劑盒應(yīng)低溫運輸和保存，試劑盒內(nèi)各試劑使用前，請短暫離心。  

3. 檢測時，提取樣本必須在生物安全柜中進(jìn)行，且使用時要注意橫向污染。  

4. 實驗應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)操作：第一區(qū)：試劑制備區(qū)—準(zhǔn)備擴增所需試劑；  

第二區(qū)：樣本處理區(qū)—待測樣本和對照品處理；  

第三區(qū)：PCR擴增區(qū)—PCR擴增檢測。  

本產(chǎn)品為一次性用品，使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應(yīng)作為傳染源按照國家相關(guān)法律法規(guī)處理。