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技術(shù)中心

通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

2015年05月04日 10:05:55人氣:1178來源:上海哈靈生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞生物試劑,化學(xué)試劑,標(biāo)準(zhǔn)試劑
【資料簡介】

主要用途


 通用型DNA損傷彗星檢測試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞、組織、血液、骨髓等樣品的DNA損傷研究,包括DNA斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)DNA修復(fù),應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。


技術(shù)背景


彗星檢測技術(shù)Comet assay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(single cell gel electrophoresis assay;SCGE或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgel electrophoresis assay,是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子移圖形,形成彗星拖尾(comet tail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:*,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測的敏感程度。性電泳(alkaline electrophoresis)為常規(guī)電泳檢測,可以檢測單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(diǎn)(apurinic site嘧啶核酸位點(diǎn)(apyrimidic site)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labile DNA adduct等DNA損傷。

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