免費(fèi)代測人神經(jīng)營養(yǎng)因子3ELISA檢測試劑盒

【資料簡介】

本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：血清或血漿

 

試驗原理：

NT-3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.ELISA檢測試劑盒已知NT-3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將NT-3和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NT-3的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

 

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。ELISA檢測試劑盒一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

操作注意事項

1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

9． 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

 

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

1． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

 

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。

4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

 

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

 

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、ELISA檢測試劑盒儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的NT-3標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的NT-3含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

 

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

 

4、敏感度： 1.0 pg/ml

醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH) 48T/96T Y11077 Homo sapiens (Human)
成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Y11078 Rattus norvegicus (Rat)
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T Y11079 Rattus norvegicus (Rat)
激肽釋放酶10(KLK10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kallikrein 10 (KLK10) 48T/96T Y11080 Rattus norvegicus (Rat)
組織蛋白酶S(CTSS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin S (CTSS) 48T/96T Y11081 Homo sapiens (Human)
白介素32(IL32)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 32 (IL32) 48T/96T Y11082 Homo sapiens (Human)
亮氨酸豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 48T/96T Y11083 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白X(TNX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11084 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白X(TNX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11085 Rattus norvegicus (Rat)
肌腱蛋白X(TNX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tenascin X (TNX) 48T/96T Y11086 Mus musculus (Mouse)
谷胱甘肽過氧化酶1(GPX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1) 48T/96T Y11087 Mus musculus (Mouse)
黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melanoma Antigen Family A1 (MAGEA1) 48T/96T Y11088 Mus musculus (Mouse)
芳香胺-N-乙?；D(zhuǎn)移酶(AANAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arylalkylamine-N-Acetyltransferase (AANAT) 48T/96T Y11089 Homo sapiens (Human)
肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 48T/96T Y11090 Mus musculus (Mouse)
多配體蛋白聚糖4(SDC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syndecan 4 (SDC4) 48T/96T Y11091 Homo sapiens (Human)
組織因子通道抑制因子2(TFPI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tissue Factor Pathway Inhibitor 2 (TFPI2) 48T/96T Y11092 Homo sapiens (Human)
免疫球蛋白D(IgD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin D (IgD) 48T/96T Y11093 Homo sapiens (Human)
肌酸激酶MB同工酶(CKMB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) 48T/96T Y11094 Mus musculus (Mouse)
肌酸激酶MB同工酶(CKMB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) 48T/96T Y11095 Rattus norvegicus (Rat)
α1-抗胰蛋白酶(α1AT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Antitrypsin (a1AT) 48T/96T Y11096 Mus musculus (Mouse)
血小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 48T/96T Y11097 Sus scrofa; Porcine (Pig)
血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 48T/96T Y11098 Sus scrofa; Porcine (Pig)
叉頭框蛋白M1(FOXM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein M1 (FOXM1) 48T/96T Y11099 Mus musculus (Mouse)
神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 1 (NRG1) 48T/96T Y11100 Rattus norvegicus (Rat)
神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 1 (NRG1) 48T/96T Y11101 Mus musculus (Mouse)
膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Y11102 Homo sapiens (Human)
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Epiregulin (EREG) 48T/96T Y11103 Homo sapiens (Human)
神經(jīng)纖維素2(NF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurofibromin 2 (NF2) 48T/96T Y11104 Mus musculus (Mouse)
心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 3, ELISA檢測試劑盒Muscle And Heart (FABP3) 48T/96T Y11105 Rattus norvegicus (Rat)
頂體蛋白(ACR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Acrosin (ACR) 48T/96T Y11106 Homo sapiens (Human)