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一站式病毒DNA-RNAout
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關(guān) 鍵 詞 | 一站式病毒DNA-RNAout |
- 【資料簡(jiǎn)介】
一站式病毒DNA-RNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn) 本產(chǎn)品是天澤基因整合一管式病毒DNAOUT和一管式病毒RNAOUT兩產(chǎn)品而得,專(zhuān)門(mén)用于從血清(血漿)等液體樣品中同時(shí)提取病毒DNA (如HBV DNA)和病毒RNA (如HCV RNA和HIV RNA)的產(chǎn)品。本產(chǎn)品靈敏度高,穩(wěn)定性好,使用簡(jiǎn)單快捷,尤其適合于整合到臨床PCR或RT-PCR檢測(cè)試劑盒中。
1. 回收率高,可以達(dá)到90%以上,高于絕大部分基于離心柱的提取方法??梢愿鶴IAGEN的同類(lèi)產(chǎn)品媲美。
2. 靈敏度高,通過(guò)PCR檢測(cè)到病毒DNA的zui終靈敏度可以達(dá)到30拷貝/mL樣品,通過(guò)RT-PCR檢測(cè)到病毒RNA的zui終靈敏度可以達(dá)到50拷貝/mL樣品。
3. 一管式操作,減少了樣品污染的可能。
4. 一站式套裝,除樣品外客戶(hù)不需要準(zhǔn)備任何試劑,降低了實(shí)驗(yàn)誤差。
5. 安全無(wú)毒,不需要使用*和氯仿等有機(jī)溶液。
6. 處理量大,如果加上病毒離心富集步驟,zui多可以處理1.5 mL液體病毒樣品。
7. 與PCR、熒光PCR、RT-PCR、熒光RT-PCR等后續(xù)反應(yīng)兼容。
規(guī)格及成分 成 份 50次
溶液A 30 mL
溶液B 40 mL
溶液C 50 mL
溶液D 10 mL
使用手冊(cè) 1份運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸,溶液A4℃保存,溶液B和溶液C室溫保存,有效期一年。溶液B和溶液C具有揮發(fā)性,使用后需要將瓶蓋擰緊。
自備試劑 無(wú)
使用方法 1. 將0.1-0.2 mL液體樣品轉(zhuǎn)移到1.5 mL旋蓋離心管中。如果需要富集樣品中的病毒,可以先將1.5 mL液體樣品轉(zhuǎn)移到1.5 mL旋蓋離心管中,然后4℃ 24,000 g離心60分鐘,移棄1.3 mL上清液后繼續(xù)操作下一步的操作。
2. 加入0.6 mL溶液A,蓋上蓋子后振蕩3-5秒. 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分搖勻后方可使用。
3. 室溫靜置10分鐘。
4. 加入0.6 mL溶液B,蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
5. 15,000 g室溫離心15分鐘。強(qiáng)烈建議在離心管管壁上用記號(hào)筆做簡(jiǎn)單標(biāo)記以區(qū)別離心面和向心面。
6. 小心移棄上清。注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0 mL 溶液C,振蕩數(shù)秒后15,000 g室溫離心5分鐘。注意:將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要離心面向外。
8. 移棄上清,注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暫離心數(shù)秒, 注意:將離心管放入離心機(jī)時(shí)一定要離心面向外。
10. 小心移棄殘留上清(殘留的溶液C會(huì)影響后續(xù)反應(yīng))。此時(shí)離心面的管壁上將有可見(jiàn)的膜狀沉淀。
11. 加入100-200 μl溶液D,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀,使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?,F(xiàn)象。不要離心只取上清使用,因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻蠨NA和RNA,必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
12. 直接取適量樣品用于PCR或RT-PCR,也可短期保存于-20℃或-80℃。
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