大鼠腸促*肽（CCK）說明書

【資料簡介】

上海博研

大鼠腸促*肽（CCK）操作步驟
1.   標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
800ng/L   5 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400ng/L   4 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200ng/L   3 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100 ng/L  2 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50 ng/L  1 號標(biāo)準(zhǔn)品  150µl 的2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 
 
2.   加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
  2
然后再加待測樣品 10 µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.   溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。      
4.   配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.   洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此
重復(fù)5 次，拍干。
6.   加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。  
7.   溫育：操作同 3。
8.   洗滌：操作同 5。
9.   顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鐘。
10.  終止：每孔加終止液50µl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.  測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。  測定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠腸促*肽（CCK）實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠腸促*肽（CCK） 水平。用純化的大鼠腸促
*肽（CCK） 抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腸促*肽
（CCK） ，再與HRP 標(biāo)記的腸促*肽（CCK） 抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)
過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)
化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腸促*肽（CCK） 呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波
長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠腸促*肽（CCK） 濃度。  
大鼠腸促*肽（CCK）試劑盒組成  
1  30倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標(biāo)試劑  6ml×1 瓶  8  標(biāo)準(zhǔn)品（1600 ng/L ）  0.5ml×1 瓶
3  酶標(biāo)包被板  12孔×8 條  9  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液  1.5 ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份
5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11   封板膜  2 張    
6  顯色劑 B 液  6ml×1/ 瓶  12  密封袋  1 個